[发明专利]一种区分不同基原凌霄花药材的色谱方法

说明书

本发明公开了一种区分不同基原凌霄花药材的色谱方法，包括1)供试品溶液的制备、2)参照物溶液的制备、3)色谱方法的建立、4)凌霄花药材对照指纹图谱制定、5)不同基原凌霄花药材鉴别等步骤，通过峰5的有无可区分凌霄花两基原，完成对凌霄花(美洲凌霄)药材与凌霄花(凌霄)药材的区分。本发明采用超高效液相色谱法构建凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)的UPLC特征图谱，对区别成分进行质谱指认和对照品确认，具有专属性强、稳定性高、重复性好的特点，实现有效鉴别凌霄花多基原的目的，同时有助于完善凌霄花药材的质量标准。

技术领域

本发明涉及中药质量控制，尤其涉及一种区分不同基原凌霄花药材的色谱方法。

背景技术

凌霄花药材为紫葳科植物凌霄Campsis grandiflora(Thunb.)K.Schum.或美洲凌霄Campsis radicans(L.)Seem.的干燥花。具有活血通经、凉血祛风的功效。目前全国凌霄属植物有2种，1种为凌霄Campsis grandiflora(Thunb.)K.Schum.，产于我国和日本，主要分布于长江流域及广东、广西、贵州等地；另1种为美洲凌霄Campsis radicans(L.)Seem.，原产北美洲，现我国也广泛栽培，提供观赏或作药用，主产于江苏、浙江、安徽、广西等地，目前已成为凌霄花药材的主要来源。凌霄花主要含三萜类、黄酮类、苯丙醇苷类、环烯醚萜苷类、挥发油等成分；现代药理研究表明，凌霄花有改善血液循环、舒张动脉、抑制血栓形成、抗氧化、抗炎等作用，临床用于治疗妇科疾病。据报道，凌霄花和美洲凌霄花化学成分不甚相同，药理作用也存在明显差异，为保证中药质量稳定，应固定一个基原。因此，建立一种全面、快速、客观评价其内在质量的方法，从而对凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)进行鉴别，对于提升中药品质具有重要的意义。

查阅文献，目前对于凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)的鉴别研究，多采用传统的性状鉴别、显微鉴别或者薄层鉴别方法。许欣荣等根据性状、花萼、花冠表面显微特征对凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)提出了鉴别依据。宋学华等对凌霄花的花粉粒进行了电镜扫描，来李娟等建立凌霄花薄层色谱鉴别方法，用于凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)及其混伪品的鉴别。

目前，法定标准对凌霄花药材分别从来源、性状、显微、薄层、检查项进行了标准限定，尚无含量测定和特征图谱项目，现有质量评价方法难以控制凌霄花药材真伪和优劣。以上对凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)鉴别研究及凌霄花指纹图谱等研究均存在一些缺陷，1、性状鉴别虽解决不少质量把关的第一线问题，但随着社会的发展和环境的改变，相应的性状鉴定指标记述尚未建立起来，加上性状鉴定要求鉴定者有丰富的实践经验和长期的知识积累，给推广造成一定的难度；2、显微鉴别存在分辨率低，对于多基原、品种混乱药材鉴定较为困难；3、薄层色谱法区分，存在灵敏度不足、专属性不强，尤其对近缘中药化学成分类似时，其分辨类不高；4、上述仅对美洲凌霄花建立指纹图谱，未对凌霄花进行研究。

因此，现有技术还缺少一种能区分凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)的超高效液相色谱方法，可以克服上述现有技术的不足，能够区分凌霄花两个基原，对凌霄花质量进行专属性评价。

发明内容

发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种区分不同基原凌霄花药材的色谱方法，采用超高效液相色谱法构建凌霄花(凌霄)和凌霄花(美洲凌霄)的UPLC特征图谱，对区别成分进行质谱指认和对照品确认，具有专属性强、稳定性高、重复性好的特点，实现有效鉴别凌霄花多基原的目的，同时有助于完善凌霄花药材的质量标准。

技术方案：本发明的一种区分不同基原凌霄花药材的色谱方法，其特征在于：包括下述步骤：

1)供试品溶液的制备：取供试品粉末加入甲醇溶液溶解，加热回流冷却后通过甲醇溶液补足定量，摇匀过滤后取续滤液，获得供试品溶液；