[发明专利]一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法

说明书

本公开涉及一种同时检测血液中9种抗生素的LC‑MS/MS分析方法，(1)制备至少三种不同浓度的标准溶液，并分别建立9种抗生素的标准曲线；其中，所述9种抗生素包括头孢哌酮、头孢他啶、美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑、氟康唑、哌拉西林、泊沙康唑和伊曲康唑；(2)利用LC‑MS/MS对待测样品进行检测，并利用步骤(1)确定的标准曲线确定待测样品中9种抗生素的含量。本公开提供的分析方法能够实现9种抗生素的同时检测，一份样本即可完成检测，并且本公开提供的分析方法重现性良好，加样回收率高，检测结果准确性高，检测过程简便快捷，分析时间短，实验成本低，有利于大批量的样本检测。

技术领域

本公开涉及血药浓度监测技术领域，尤其涉及一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法。

背景技术

细菌感染是致病性和死亡率的一个重要来源，使用抗生素治疗成为住院病人管理的一个重要方面。然而，目前已经证明基于标准给药方案的抗生素治疗的病人，其血药浓度往往不能达到有效治疗浓度，这大大影响了治疗效果，并可能使病人产生多种细菌的耐药性；因为不同的病人药物代谢动力学存在个体间的差异，简单的增加药物剂量可能会引起危险的毒副作用。因此需要进行严格的体内药物浓度监测，特别是针对治疗浓度狭窄的药物。

头孢哌酮为广谱的第三代头孢菌素，对革兰氏阳性和阴性需氧菌或厌氧菌，尤其对多数药物耐药的铜绿假单胞菌有强大的杀菌作用，其应用广泛，临床用于治疗各科细菌感染，均有良好疗效。头孢他啶为半合成第三代头孢菌素，为新生儿感染常用治疗药物，主要以原形随尿液排泄。美罗培南具有抗菌谱广、杀菌作用迅速、耐药率低及耐受性好等优点，常用于重症感染的治疗。伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、氟康唑属于三唑类广谱抗真菌药，是目前治疗侵袭性真菌感染的一线药物，但三者的治疗窗窄，个体间差异较大，且极易与其他药物产生相互作用，尤其是伏立康唑以非线性药代动力学代谢，血药浓度波动较大。利奈唑胺属于噁唑烷酮类化学合成抗菌药物，对葡萄球菌属、肺炎链球菌属、肠球菌属细菌均具有高度的抗菌活性，特别是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐万古霉素葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌等具有较好的抗菌作用。哌拉西林是β-内酰胺类抗生素，抗菌谱广，但对酶不稳定，易产生耐药性。以上9种抗生物分别针对于不同的细菌感染，但是均存在治疗窗窄，个体间差异较大，经验性给药方案不能使多数重症患者的血药浓度达到治疗目标范围，因此需要进行血药浓度监测从而优化重症患者的治疗方案。

目前的抗生素血药浓度监测大多都是同一种类的抗生素放在一个方法包中，但在实际情况中，往往会存在联合用药的情况，特别是不同生理功能的抗生素同时用药，因此，若想对几类抗生素同时进行药物浓度监测，则需要一次采集较大量的血，分别处理，分别监测，不仅样本的使用量较大，而且检测时间长，检测结果较慢。

因此，需要提供一种能够同时检测血液中9种抗生素的液相色谱质谱分析方法，确保只需要用一份标本就可以完成多种抗生素的血药浓度监测，能够提高检测效率。

发明内容

为了解决上述技术问题，本公开提供了一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法。

第一方面，本公开提供了一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法，所述方法包括：

(1)制备至少三种不同浓度的标准溶液，并分别建立9种抗生素的标准曲线；

其中，所述9种抗生素包括头孢哌酮、头孢他啶、美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑、氟康唑、哌拉西林、泊沙康唑和伊曲康唑；

(2)利用LC-MS/MS对待测样品进行检测，并利用步骤(1)确定的标准曲线确定待测样品中9种抗生素的含量。

现有的方法包通常仅包括一类生理功能相近且极性相近的药物，本公开提供的9种抗生素的极性跨度较大，并无法使用目前现有的方法完成检测，并且在目前的质谱检测中，头孢哌酮和头孢他啶一般采用负离子检测模式，而其他抗生素一般采用正离子检测模式。本公开提供的9种抗生素的极性大小见表1：

表1