[发明专利]一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法

权利要求书

1.一种同时检测血液中9种抗生素的LC-MS/MS分析方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)制备至少三种不同浓度的标准溶液，并分别建立9种抗生素的标准曲线；

其中，所述9种抗生素包括头孢哌酮、头孢他啶、美罗培南、利奈唑胺、伏立康唑、氟康唑、哌拉西林、泊沙康唑和伊曲康唑；

(2)利用LC-MS/MS对待测样品进行检测，并利用步骤(1)确定的标准曲线确定待测样品中9种抗生素的含量。

2.根据权利要求1所述的LC-MS/MS分析方法，其特征在于，在所述LC-MS/MS分析方法中，液相色谱参数包括：

色谱柱为：phenomenex Luna Omega Polar C18、phenomenex Kinetex Polar C18或Shim-pack Velox SP-C18；

流速：0.2-0.5mL/min；

梯度洗脱参数包括：

0.00min：A 95-100％，B 0-5％；

0.10-1.50min：A 30-60％，B 40-70％；

1.01-3.50min：A 0-10％，B 100-90％；

2.01-5.50min：A 95-100％，B 0-5％；

质谱检测仪的检测模式为ESI+检测模式，质谱参数包括：

干燥气温度：250-350℃；干燥气流速：3-15L/min；鞘气温度：300-400℃；鞘气流速：8-11L/min；喷雾器：40-50psi；毛细管电压3000-4500V；

优选地，在所述液相色谱参数中，还包括：

使用的流动相：A为含有0.1-0.2v/v％甲酸和1-5mM甲酸铵或乙酸铵的水溶液，B为含有0-0.2v/v％甲酸的乙腈；

洗针液为含有0.1-0.5v/v％甲酸的乙腈；

进样量为1-10μL。

3.根据权利要求2所述的LC-MS/MS分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱参数包括：

0.00min：A 95-100％，B 0-5％；

0.10-1.50min：A 30-60％，B 40-70％；

1.51-3.00min：A 0-10％，B 100-90％；

3.01-5.50min：A 95-100％，B 0-5％；

优选地，所述梯度洗脱参数包括：

0.00min：A 95-100％，B 0-5％；

0.10-1.50min：A 30-45％，B 55-70％；

1.51-3.00min：A 0-10％，B 90-100％；

3.01-5.50min：A 95-100％，B 0-5％。

4.根据权利要求1-3中的任一项所述的LC-MS/MS分析方法，其特征在于，所述9种抗生素使用的内标物包括头孢哌酮-D5、头孢他啶-D5、美罗培南-D6、利奈唑胺-D3、伏立康唑-D3、氟康唑-D4、哌拉西林-D5、泊沙康唑-D4和伊曲康唑-D5。

5.根据权利要求1-4中的任一项所述的LC-MS/MS分析方法，其特征在于，所述标准溶液的制备方法包括：

将内标工作液与含有9种抗生素的标准工作液混合后，与蛋白沉淀剂混合，取上清液并利用超纯水稀释，得到所述标准溶液，所述标准工作液包括8个级别浓度；

优选地，各所述级别浓度的标准工作液均利用稀释剂由中间液稀释得到，所述中间液利用稀释剂由母液稀释得到，所述母液利用溶剂溶解所述9种抗生素各自的标准品得到；

优选地，所述内标工作液利用稀释剂由内标中间液稀释得到，所述内标中间液利用稀释剂由内标母液稀释得到。