[发明专利]一种低密度脂蛋白低速离心分离纯化方法在审
| 申请号： | 202211096997.6 | 申请日： | 2022-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN115746126A | 公开（公告）日： | 2023-03-07 |
| 发明（设计）人： | 孙臣忠 | 申请（专利权）人： | 上海市静安区市北医院 |
| 主分类号： | C07K14/775 | 分类号： | C07K14/775;C07K1/30;C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 巫蓓丽 |
| 地址： | 200435 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 密度 脂蛋白 低速 离心 分离 纯化 方法 | ||
1.一种低密度脂蛋白低速离心分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)取原料，加入PEG 6000，搅拌溶解，用离心机离心；
(b)上清中加入PEG 6000，使PEG 6000浓度达到6％，搅拌溶解，静置，将上清液倒入另外的容器；
(c)沉淀用生理盐水溶解，离心弃去不溶物，上清液再加PEG 6000，使PEG 6000浓度达到6％，搅拌溶解，静置后取沉淀，重复此步骤处理两次后用生理盐水溶解，离心弃去不溶物；
(d)上清加入8-20％的NaCl固体粉末搅拌溶解，离心去除表明微小的气泡，再加入8-15％的PEG 6000搅拌溶解，离心，保留上层漂浮物，弃下层液体和沉淀，重复此步骤2-3次，最后用生理盐水溶解漂浮物。
2.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤中离心机的离心速度为3000rpm。
3.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(d)中NaCl固体粉末的浓度为20％，PEG 6000的浓度为12％。
4.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(a)中的原料为人血清、血浆和提取了其他蛋白后剩余的血浆下脚。
5.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(a)中加入的PEG 6000的浓度为4％。
6.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(b)中加入的PEG 6000的浓度为2％。
7.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(c)和(d)中生理盐水为原料体积的10％。
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