[发明专利]适用于干血斑样本中维生素D的质谱检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.适用于干血斑样本中维生素D的质谱检测试剂盒，其特征在于，包括干血斑取样片和质谱检测套件；

所述干血斑取样片包括能够打开的外壳和放置在所述外壳内的维生素D冻干片，所述维生素D冻干片中的维生素D的含量为标准值，所述维生素D冻干片的上表面为凹面，且为多孔蜂窝结构；

所述质谱检测套件包括：标准品、内标溶液、液相色谱洗脱液、蛋白沉淀剂、复溶剂和耗材；

所述标准品用于配置标准浓度的维生素D溶液；

所述标准品的外表面标记有用于配置的浓度和需加入复溶剂的体积，所述标准品内含有与标示浓度匹配的定量的维生素D的冻干粉，加入标示体积的复溶剂后即可配置为标示浓度的维生素D溶液；所述标准品至少有六个，标示浓度从低到高；

所述复溶剂为不含待测维生素D的空白人血清基质。

2.根据权利要求1所述的适用于干血斑样本中维生素D的质谱检测试剂盒，其特征在于，所述液相色谱洗脱液包括流动相A和流动相B，流动相A为标准浓度的甲酸水溶液，流动相B为标准浓度的甲酸甲醇溶液。

3.根据权利要求1所述的适用于干血斑样本中维生素D的质谱检测试剂盒，其特征在于，所述内标溶液由含有VD3-d6和VD2-d6的同位素内标溶液组成。

4.根据权利要求1所述的适用于干血斑样本中维生素D的质谱检测试剂盒，其特征在于，所述蛋白沉淀剂为乙腈和异丙醇的混合液，所述乙腈和异丙醇的体积比为1:1。

5.一种干血斑样本中维生素D的检测方法，其特征在于，采用如权利要求1-4任一项所述的检测试剂盒进行检测，

步骤1制备干血斑样本：打开外壳，将全血滴加在维生素D冻干片的上表面，自然干燥后关闭外壳；

步骤2拟合标准曲线方程：分别向每个标准品中加入标示体积的复溶剂，从而配置成标示浓度的维生素D溶液；

分别向上述配置的每份维生素D溶液中加入等量的内标溶液和蛋白沉淀剂；

随机抽取至少3个标准品使用液质联用仪检测，并拟合每一种维生素D溶液所对应的标准曲线方程；

使用液质联用仪以及得到的标准曲线方程检测剩余标准品中维生素D溶液的浓度，判断检测结果是否在预设的范围内，如果是，则标准曲线方程有效；

步骤3检测样品：取出含有干血斑样本中维生素D冻干片，使用复溶剂对维生素D冻干片进行复溶制备成待测溶液，使用液质联用仪以及步骤2中得到的标准曲线方程对待测溶液中的维生素D溶液进行检测。

6.根据权利要求5所述的一种干血斑样本中维生素D的检测方法，其特征在于，标准品和待测样品中加入的内标溶液的量相同。