[发明专利]一种仿生膜包裹尿酸酶纳米粒及其制备方法

权利要求书

1.一种仿生膜包裹尿酸酶纳米粒，其特征在于，包括尿酸酶纳米粒和仿生膜包裹层；

所述的仿生膜包裹尿酸酶纳米粒中尿酸酶含量为0.1-10U/mL，缓冲液pH为6.5-9，其余各组分质量比为：

透明质酸-甘氨酸-甲氧基聚乙二醇          10-200份，

环糊精                                  600-1200份；

所述的仿生膜包括外泌体、或者外泌体和红细胞膜的融合膜，即：(1)外泌体，即牛奶外泌体、羊奶外泌体、兔奶外泌体和其它哺乳动物的奶源外泌体的一种；(2)外泌体和红细胞膜的融合膜，即外泌体与红细胞膜形成的融合膜；

所述的环糊精包括：羟丙基-α-环糊精、磺丁基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、羟丁基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、磺丁基-γ-环糊精的一种或几种的混合物；

所述的一种仿生膜包裹尿酸酶纳米粒的制备包括下列步骤：(1)尿酸酶纳米粒的制备方法：将处方量透明质酸-甘氨酸-甲氧基聚乙二醇溶于pH 6.5-9的Tris-HCl缓冲液得到1％-3％透明质酸-甘氨酸-甲氧基聚乙二醇溶液；将处方量环糊精溶于pH 6.5-9的Tris-HCl缓冲液得到2％-6％环糊精溶液；将尿酸酶溶于1-5mL的透明质酸-甘氨酸-甲氧基聚乙二醇溶液中，然后将其缓慢滴加入环糊精溶液，磁力搅拌1.5-2.5小时，即得尿酸酶纳米粒；(2)外泌体的制备方法：取牛奶、羊奶、兔奶或其他哺乳动物的奶，离心20-40分钟，取上清液，离心50-70分钟，取上清液，再离心80-100分钟，收集沉淀，分散于pH 7.4的磷酸盐缓冲液，即得外泌体；(3)红细胞膜的制备方法：取血液离心4-10分钟后，除去上清液后加入适量10mM pH 7.4的磷酸盐缓冲液，继续离心至上层血清无色透明，收集下层沉淀，洗涤后将沉淀重悬于2.5mM pH 7.4的磷酸盐缓冲液中，在冰浴条件下低渗裂解20-40分钟后在低温条件下离心，直至上清液澄清透明；在使用10mM pH 7.4的磷酸盐缓冲液进行2-4次洗涤离心循环后，收集底部沉淀即得红细胞膜；(4)融合膜的制备方法：将步骤(2)得到的外泌体与步骤(3)得到的红细胞膜以质量比1:2至2:1混匀后备用；(5)仿生膜包裹尿酸酶纳米粒的制备方法：将步骤(2)得到的外泌体或步骤(4)得到的融合膜与步骤(1)得到的尿酸酶纳米粒以体积比1:2至2:1混匀，涡旋1-5分钟，冰浴，超声10-30分钟，即得仿生膜包裹尿酸酶纳米粒。