[发明专利]一种SH3TC2基因致病突变体及其在制备腓骨肌萎缩症4C型诊断试剂盒中的应用

权利要求书

1.一种SH3TC2致病突变基因，其特征在于，所述SH3TC2致病突变基因包括c.590_591insAATG；

所述c.590_591insAATG在登录号为NM_024577.4的6号外显子的第590位和591位间存在AATG插入突变。

2.一种SH3TC2基因致病突变体，其特征在于，所述SH3TC2基因致病突变体为复合杂合突变，包括c.590_591insAATG和c.3733_3734delGG；

所述c.590_591insAATG在登录号为NM_024577.4的6号外显子的第590位和591位间存在AATG插入突变；

所述c.3733_3734delGG在登录号为NM_024577.4的17号外显子的第3733位和3734位存在GG缺失突变。

3.扩增权利要求2所述SH3TC2基因致病突变体的引物组，其特征在于，所述引物组包括：引物对1和引物对2；

所述引物对1包括SH3TC2-1F和SH3TC2-1R；

所述引物对2包括SH3TC2-2F和SH3TC2-2R；

所述SH3TC2-1F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述SH3TC2-1R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述SH3TC2-2F的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述SH3TC2-2R的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.利用权利要求1所述SH3TC2致病突变基因或利用权利要求2所述的SH3TC2基因致病突变体或权利要求3所述的引物组在制备腓骨肌萎缩症4C型诊断试剂或试剂盒中的应用。

5.一种腓骨肌萎缩症4C型的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒包括权利要求3所述的引物组。

6.根据权利要求5所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包括测序引物；所述测序引物包括：引物对3和引物对4；

所述引物对3包括SH3TC2-Seq1F和SH3TC2-Seq1R；

所述引物对4包括SH3TC2-Seq2F和SH3TC2-Seq2R；

所述SH3TC2-Seq1F的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述SH3TC2-Seq1R的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述SH3TC2-Seq2F的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述SH3TC2-Seq2R的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。

7.根据权利要求5或6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包括c.3733_3734delGG位点阳性突变参考品DNA1和c.590_591insAATG位点阳性突变参考品DNA2；

所述DNA1的单链核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

所述DNA2的单链核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

8.一种鉴定权利要求2所述SH3TC2基因致病突变体的基因型的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

以待测样品DNA为模板，利用权利要求3所述引物组进行PCR扩增，得到扩增产物；

将扩增产物进行测序，确定SH3TC2基因致病突变体的基因型。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系以20μL计，包括10×PCR缓冲液2μL、dNTPs0.4μL、SH3TC2-1F或SH3TC2-2F0.5μL、SH3TC2-1R或SH3TC2-2R0.5μL、模板1μL、Taq酶0.2μL和余量的ddH₂O。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应进程包括：95℃预变性5min；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸60s，30个循环；72℃反应7min。