[发明专利]一种高对比度真菌荧光染色液及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种真菌荧光染色液，其特征在于：所述真菌荧光染色液由A液和B液组成，其中，所述A液包括终浓度为50-500mg/L的荧光素，溶剂为水，所述的荧光素为荧光增白剂28、荧光增白剂367、荧光增白剂220、荧光增白剂85中的一种或两种以上的混合物；所述B液包括终浓度为1-100mg/L的背景荧光染料，溶剂为水，所述背景荧光染料为中性红、罗丹明B、赤藓红、Cy5、藏花红T、DiI、DiD中的一种或两种以上的混合物。

2.如权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述的荧光素为荧光增白剂28、荧光增白剂220中一种或两种的混合物。

3.如权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述的背景荧光染料为罗丹明B、藏花红T中的一种或两种的混合物。

4.如权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述A液还包括防淬灭剂、保湿剂、软化剂、通透剂和促溶剂中的一种或两种以上的混合物；所述B液还包括防腐剂。

5.如权利要求4所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述的防淬灭剂为柠檬酸钾、硬脂酸钾、醋酸钾、柠檬酸钠、硬脂酸钠、醋酸钠中的一种或两种以上的混合物；

所述的保湿剂为季戊四醇、丙二醇、甘油或山梨醇中的一种或两种以上的混合物；

所述的软化剂为水杨酸、柠檬酸、乙醇酸、苹果酸、甘醇酸或2，4，5-三甲氧基苯甲酸中的一种或两种以上的混合物；

所述的通透剂为吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、聚乙二醇辛基苯基醚或二甲基亚砜中的一种或两种以上的混合物；

所述的促溶剂为KOH、NaOH或NaCl中的一种或两种以上的混合物。

6.如权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述的防腐剂为多聚甲醛、Proclin300、山梨酸及其盐类或苯甲醇中的一种或两种以上的混合物。

7.如权利要求1所述的真菌荧光染色液，其特征在于：所述真菌荧光染色液由A液和B液组成，其中，A液由以下终浓度的各组分组成：50-500mg/L荧光素、0.1-20mg/L防淬灭剂、1-30mL/L保湿剂、10-50mg/L软化剂、10-50mL/L通透剂、5-100g/L促溶剂，溶剂为水；B液由以下终浓度的各组分组成：1-100mg/L的背景荧光染料、0.1-5mL/L防腐剂，溶剂为水。

8.如权利要求1所述的真菌荧光染色液的制备方法，其特征在于所述制备方法为：按组方将组方量的各原料均匀溶解于水中，分别得到A液和B液。

9.如权利要求1所述的真菌荧光染色液在检测真菌中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于所述应用为：将待测样本置于载玻片上，依次滴加所述A液、B液各一滴，染色5秒，盖上盖玻片，吸去多余染液，即可置于荧光显微镜下观察。