[发明专利]用于间充质干细胞培养的水凝胶、培养基及其制备方法

说明书

本发明公开了一种用于间充质干细胞培养的水凝胶、培养基及其制备方法，涉及干细胞与再生医学技术领域。其中，水凝胶包括基体组分和交联组分；基体组分、交联组分的重量比为110：(0.1～2)；所述基体组分按重量百分数计包括以下组分：明胶1～10％，海藻酸钠0.5～5％，γ‑聚谷氨酸1～6％，蒸馏水80～95％；所述交联组分选用转谷氨酰胺酶。实施本发明，可有效提升间充质干细胞的增殖和分化，提升细胞产量。

技术领域

本发明涉及干细胞与再生医学技术领域，尤其涉及一种用于间充质干细胞培养的水凝胶、培养基及其制备方法。

背景技术

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)具有免疫调节功能，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，且具有强大的增殖能力及多向分化潜能等特性。其中胎盘来源的脐带间充质干细胞，具有来源丰富、获取无创性、免疫原性低、体外增殖能力强且不受低血清和低氧影响，且无社会伦理争议等方面的优点，具有良好的临床应用前景。但目前对于脐带间充质干细胞的培养方法大多采用2D培养，增殖效率低，存在脐带间充质干细胞传代后易衰老，细胞扁平，增殖缓慢或停止增殖，失去分化能力等一系列的问题，无法短时间内满足细胞治疗过程中的产品需求，因此需要新的培养方法短期内有效率的获得高质量的脐带间充质干细胞，维持细胞在增殖过程中的分化能力。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种用于间充质干细胞培养的水凝胶，其可与基础培养基共同作用，实现间充质干细胞的3D培养，提升细胞产量，维持细胞干性。

本发明还要解决的技术问题在于，提供一种用于间充质干细胞培养的水凝胶的制备方法。

本发明还要解决的技术问题在于，提供一种用于间充质干细胞培养的培养基，其可提升间充质干细胞的产量，维持其干性。

本发明还要解决的技术问题在于，提供一种用于间充质干细胞培养的培养基的制备方法，其制备得到的培养基可提升间充质干细胞的产量，维持其干性。

本发明还要解决的技术问题在于，提供一种间充质干细胞的制备方法，其制备得到的间充质干细胞的干性强，具有较强的分泌能力和免疫调节能力。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种用于间充质干细胞培养的水凝胶，其包括基体组分和交联组分；所述基体组分、交联组分的重量比为110：(0.1～2)；

所述基体组分按重量百分数计包括以下组分：

明胶1～10％，海藻酸钠0.5～5％，γ-聚谷氨酸1～6％，蒸馏水80～95％；

所述交联组分选用转谷氨酰胺酶。

作为上述技术方案的改进，所述基体组分按重量百分数计由以下组分组成：

明胶3～7％，海藻酸钠1～3％，γ-聚谷氨酸2～5％，蒸馏水88～93％。

作为上述技术方案的改进，所述转谷氨酰胺酶为微生物产转谷氨酰胺酶。

相应的，本发明还公开了一种上述的用于间充质干细胞培养的水凝胶的制备方法，其包括：

(1)将明胶、海藻酸钠、γ-聚谷氨酸与水混合均匀，得到第一溶液；

(2)将所述第一溶液、交联组分混合，交联预设时间后得到用于间充质干细胞培养的水凝胶成品。

相应的，本发明还公开了一种用于间充质干细胞培养的培养基，其包括上述的用于间充质干细胞培养的水凝胶。

作为上述技术方案的改进，还包括基础培养基、干细胞因子和血清替代物；

所述培养基中，基础培养基为DMEM/F12培养基，干细胞因子的含量为8～15ng/mL，血清替代物的体积浓度为5％～10％，水凝胶的含量为110～170mg/mL。