[发明专利]一种细胞分选装置及免疫细胞分选方法在审
申请号: | 202211008947.8 | 申请日: | 2022-08-22 |
公开(公告)号: | CN115449483A | 公开(公告)日: | 2022-12-09 |
发明(设计)人: | 赵海苹;赵阳;黄成军;耿晓坤;李宇昂;李雪 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学宣武医院;中国科学院微电子研究所;首都医科大学附属北京潞河医院 |
主分类号: | C12M3/06 | 分类号: | C12M3/06;C12M1/12;C12M1/00;C12N5/078 |
代理公司: | 北京开阳星知识产权代理有限公司 11710 | 代理人: | 董亚男 |
地址: | 100053*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 分选 装置 免疫 方法 | ||
1.一种细胞分选装置,其特征在于,包含:衬底结构、细胞滤膜和上盖;
所述衬底结构上设置有至少一个凹坑,所述凹坑的开口面积大于坑底的面积,且所述坑底的投影在所述开口的投影面积内;
所述凹坑内设置有所述上盖,所述上盖将所述凹坑内的空间全部填充;
所述细胞滤膜设置于所述衬底结构和所述上盖之间;
所述凹坑的内壁上设置有多个第一凸起,所述上盖的外壁上设置有多个第二凸起;
所述坑底内设置有出口;所述上盖和所述细胞滤膜之间的夹缝均为入口。
2.根据权利要求1所述的细胞分选装置,其特征在于,所述凹坑为倒置的圆锥或棱锥。
3.根据权利要求2所述的细胞分选装置,其特征在于,
所述棱锥选自正三棱锥、正四棱锥、正五棱锥、正六棱锥、正七棱锥、正八棱锥、正九棱锥、正十棱锥、正十一棱锥和正十二棱锥;所述出口设置于所述圆锥或所述棱锥的顶点。
4.根据权利要求1所述的细胞分选装置,其特征在于,所述第一凸起为半球体或由半球体与底座组合而成;所述底座选自圆柱体、圆台体或多棱柱体,所述底座的上表面与所述半球体为圆滑过渡。
5.根据权利要求1所述的细胞分选装置,其特征在于,所述第一凸起的底部直径或边长为0.1mm~10mm;所述第一凸起的高度为0.1mm~10mm;所述第一凸起沿所述凹坑的内壁至少设置一排。
6.根据权利要求1所述的细胞分选装置,其特征在于,所述细胞滤膜的孔隙率为11%~14%,厚度为12μm~27μm,孔径为3μm~8μm;孔径优选为3μm~5μm;
所述细胞滤膜为浸泡于含有质量百分比浓度为0.5~1.5%的BSA溶液中进行表面蛋白修饰后的细胞滤膜。
7.根据权利要求1所述的免疫细胞分选装置,其特征在于,多个所述第二凸起用于撑起所述细胞滤膜,同时形成用于液体流通的通路;
所述第二凸起的高度为1μm~5000μm。
8.根据权利要求1所述的细胞分选装置,其特征在于,所述衬底结构和所述上盖为透明树脂材料;所述细胞滤膜选自聚对苯二甲酸乙二醇酯材料。
9.一种免疫细胞分选方法,其特征在于,使用如权利要求1~8任一项所述的细胞分选装置对待测样本中的目的细胞进行分离,至少包括步骤:
S1、采用不含钙镁离子的DPBS溶液润洗所述细胞滤膜:
S2、从所述入口加入所述待测样本:
S3、过滤完成后,收集所述细胞滤膜上分选得到的目的细胞:采用不含钙镁离子的DPBS溶液冲洗所述上盖表面和所述细胞滤膜的表面,得到含有目的细胞的悬浮液。
10.根据权利要求9所述方法,其特征在于,
在S2中,将血液样本稀释后加入,稀释的倍数为1~3倍;
在S2中,加入所述待测样本后,采用DPBS溶液清洗盛放所述待测样本的容器,将清洗液从所述入口加入所述细胞分选装置;清洗用的DPBS溶液的体积为所述血液样本的2~5倍;
在S3中,所述冲洗所用的DPBS溶液为所述血液样本体积的8~15倍。
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