[发明专利]IPS来源的CAR-NK细胞及其治疗癌症的用途

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体（CAR），其特征在于：所述CAR结构包括依次连接的信号肽、靶向c-Met抗原结合域、靶向PD-L1抗原结合域铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号域；所述靶向c-Met抗原结合域包括依次如SEQ ID NO:1-3所示重链CDR1-3区和SEQ ID NO:4-6所示轻链CDR1-3区；所述靶向PD-L1抗原结合域包括依次如SEQ ID NO:7-9所示重链CDR1-3区和SEQ ID NO:10-12所示轻链CDR1-3区。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体（CAR），其特征在于，所述靶向c-Met抗原结合域包括如SEQ ID NO:13所示重链可变区和如SEQ ID NO:14所示轻链可变区。

3.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体（CAR），其特征在于，所述靶向PD-L1抗原结合域包括如SEQ ID NO:15所示重链可变区和如SEQ ID NO:16所示轻链可变区。

4.根据权利要求3所述的嵌合抗原受体（CAR），其特征在于，所述共刺激因子选自4-1BB，其氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示。

5.根据权利要求4所述的嵌合抗原受体（CAR），其特征在于，所述CAR氨基酸序列如SEQID NO:18所示。

6.一种通用型CAR-NK细胞，其特征在于，其包含如权利要求 1-5 任一项所述的嵌合抗原受体（CAR）；所述NK细胞为iPSC细胞诱导而得的iPSC-NK细胞。

7.根据权利要求6所述的CAR-NK细胞，其特征在于，iPSC-NK细胞的制备方法包括：培养iPSC细胞；iPSC细胞造血分化，将iPSC细胞置于造血分化诱导培养基中进行孵育，所述造血分化诱导培养基包括50 ng/mL成纤维细胞生长因子、50 ng/mL 骨形态发生蛋白 4、50 ng/mL干细胞因子和20 ng/mL血管内皮生长因子；iPSC细胞NK分化，将造血分化的iPSC细胞置于含有饲养层细胞和NK分化诱导培养基中，所述NK分化诱导培养基包括20%FBS、10 ng/mL白介素-15、10 ng/mL 白介素-7、20 ng/mL 干细胞因子和10 ng /mL fms-样酪氨酸激酶-3配体，每 3-4 天更换新鲜培养基，每 7 天更换新鲜饲养层细胞中，培养14 -21 天后收集得到所述iPSC-NK细胞。

8.权利要求6-7任一项所述的CAR-NK细胞在制备肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤选自肝癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、直肠癌、胃癌、鼻咽癌、乳腺癌、食道癌、皮肤癌中的一种或几种。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述肿瘤为肝癌。