[发明专利]一种盘状测序芯片及应用其的测序样本制备方法在审
申请号: | 202210981829.9 | 申请日: | 2022-08-16 |
公开(公告)号: | CN115478003A | 公开(公告)日: | 2022-12-16 |
发明(设计)人: | 张明霞;王坤琴;李寅青;范璐;陈彬超;范兆飞;顾志鹏 | 申请(专利权)人: | 苏州德运康瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/33 | 分类号: | C12M1/33;C12M1/00;C12Q1/6806;B01L3/00 |
代理公司: | 北京商专润文专利代理事务所(普通合伙) 11317 | 代理人: | 张鑫 |
地址: | 215000 江苏省苏州市吴江经济技*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 盘状测序 芯片 应用 样本 制备 方法 | ||
本发明公开了一种盘状测序芯片及应用其的测序样本制备方法。该芯片包括一块圆形的顶盘和一块圆形的底盘,所述顶盘放置在所述底盘上并且能够相对转动;所述顶盘的底面形成有从中心向圆周延伸排列的上凹槽,所述底盘的顶面形成有分别从中心向圆周延伸排列的下通槽和下凹槽;其中,各所述上凹槽位于各所述下通槽之间的正上方,并且所述上凹槽的数量和间距均与所述下通槽以及所述下凹槽一致。本发明中的测序芯片设置有能够分别通入细胞的顶盘和底盘,并且使两者相对转动进行交错,从而使细胞进行混合反应,从而实现便捷高效的单细胞测序工作,并且还降低了细胞受到污染的风险。
技术领域
本发明涉及生物设备领域,特别涉及一种盘状测序芯片及应用其的测序样本制备方法。
背景技术
在对细胞核酸进行测序的生物实验中,需要将细胞与微球以及裂解液混合使其裂解,从而使用微球捕获细胞中的mRNA等成分,以实现测序样本的制备。在现有的实验方法中,一般是设计单独的空间逐个对单细胞进行实验操作,然而限于细胞本身的较小的尺寸、较大的数量以及容易受到污染的特性,不仅操作非常不方便,并且需要耗费大量的时间,此外,还会增加细胞受到污染的风险。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供了一种盘状测序芯片及应用其的测序样本制备方法。
根据本发明的一个方面,提供了一种测序芯片,包括一块圆形的顶盘和一块圆形的底盘,所述顶盘放置在所述底盘上并且能够相对转动;
所述顶盘的底面形成有从中心向圆周延伸排列的上凹槽,所述底盘的顶面形成有分别从中心向圆周延伸排列的下通槽和下凹槽;
其中,各所述上凹槽位于各所述下通槽之间的正上方,并且所述上凹槽的数量和间距均与所述下通槽以及所述下凹槽一致。
在一些实施方式中,还包括一个支撑盘,所述支撑盘位于所述底盘的下方,并且所述支撑盘的底部中间连接有竖直的支撑块。由此,通过支撑盘和支撑块能够对底盘和顶盘进行支撑。
在一些实施方式中,每个所述下通槽的两端均与两个所述上凹槽的末端相连通。由此,描述了上凹槽与下通槽的连通方式。
在一些实施方式中,所述下凹槽呈圆形、方形或者多边形。由此,描述了下凹槽的形状。
在一些实施方式中,所述顶盘上具有多行所述上凹槽,所述底盘上具有多行所述下通槽和多行所述下凹槽,其中,各所述下通槽和各所述下凹槽交替排列。由此,顶盘和底盘配合能够同时进行多组样本制备工作。
根据本发明的一个方面,提供了一种应用了上述测序芯片的单细胞测序样本制备方法,包括以下步骤:
1)将多个微球预先分别铺设到各排所述下凹槽中;
2)将所述顶盘放置在所述底盘上,其中各排所述上凹槽位于各排所述下通槽的正上方并且相互连通;
3)将含有多个单细胞的细胞上样注入各排所述下通槽,使各所述单细胞被捕获到各排所述上凹槽中;
4)将所述顶盘和所述底盘相对转动,使各排所述上凹槽分别滑动到各排所述下凹槽的正上方;
5)各所述单细胞分别与各所述微球混合,使所述单细胞裂解并且其中的mRNA被所述微球捕获。
在一些实施方式中,还包括以下步骤:6)将清洗试剂注入各排所述下通槽中,重复步骤4)进行清洗。由此,描述了进行清洗的步骤,可以根据需要重复进行多次清洗。
在一些实施方式中,还包括以下步骤:7)将RT试剂注入各排所述下通槽中,重复步骤4)进行RT反应。由此,描述了进行RT反应的步骤,可以根据需要重复进行多次RT反应。
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