[发明专利]铜绿假单胞菌中介抗性IRP相关基因及在制备噬菌体治疗药物方面中的应用

权利要求书

1.铜绿假单胞菌中介抗性IRP相关基因，其特征在于：所述中介抗性IRP相关基因为mumC、creC、PA2268、PA4818、PA2044、PA0150、PA4183、PA1738、PA3306、pvdA、PA3950、gcvH1、rnd、PA4468和endA；

其中，所述中介抗性IRP的特点为：IRP突变株中噬菌体的受体没有发生改变，不影响噬菌体的吸附过程，但是显著影响噬菌体的繁殖速率，中介抗性IRP表型介于敏感S表型与抗性R表型之间。

2.含有如权利要求1所述的基因的铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株。

3.根据权利要求2所述的突变株，其特征在于：所述铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株的中介抗性IRP表型为新型抗逆表型，该铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株能够使噬菌体繁殖速度显著下降、细菌存活时间显著延长。

4.根据权利要求2所述的突变株，其特征在于：所述铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株能够用于筛选抑制噬菌体繁殖相关化合物，提高噬菌体治疗的效率。

5.根据权利要求2所述的突变株，其特征在于：所述铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株能够形成模糊的透明圈；

与菌株PAK相比，铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株形成噬菌斑的效率较低，形成数量较少的噬菌斑；IRP突变株形成的噬菌斑，也显著低于野生型菌株PAK；

与野生型菌株PAK相比，铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株形成感染中心的能力均显著下降，大部分IRP突变株的潜伏期显著延长；

铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株内噬菌体基因组DNA复制效率均显著下降；

利用反向PCR方法，鉴定了转座子Tn5G插入在多种不同的基因上，相应的靶位基因能够恢复铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株的表型，在spotting实验中出现清晰的透明圈，与野生型菌株PAK相同；

在噬菌体K8存在时，铜绿假单胞菌中介抗性IRP突变株都存在一定程度的生长，而敏感突变株和对照PAK菌株则完全不能生长，培养液为澄清状态。

6.根据权利要求5所述的突变株，其特征在于：所述不同的基因包括生物被膜合成相关基因mucC，铁载体合成相关基因pvdA、PA0150和PA3019，参与翻译的起始、核糖体的生物形成以及mRNA剪接的RNA解旋酶编码基因PA3950，tRNA、5S rRNA和许多小RNA成熟相关基因rnd，甘氨酸裂解系统蛋白H基因gcvH1，参与磷元素的信号传导相关基因基因creC，过氧化物歧化酶基因sodM，参与DNA的复制、重组和修复基因endA，LysR家族转录调控因子编码基因PA1738，假定的烷基化DNA修复蛋白AlkB编码基因PA3306，编码功能未知的假定蛋白的基因PA2044、PA2268、PA4183、PA3306和PA4818。

7.如权利要求1所述的基因在制备噬菌体治疗药物方面中的应用。

8.如权利要求1所述的基因在遗传改造工业发酵菌种中的应用。

9.如权利要求1所述的基因在遗传改造工业发酵中的底盘细胞方面中的应用。

10.如权利要求1所述的基因在延长噬菌体胁迫下细菌的寿命方面中的应用。