[发明专利]一种产四甲基吡嗪的重组乳酸菌、其构建方法及其应用

权利要求书

1.一种产四甲基吡嗪的重组乳酸菌，其特征在于，所述的重组乳酸菌，以乳酸菌为宿主，包括核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的乙偶姻操纵子基因；该菌株已于2022年4月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2022430。

2.如权利要求1所述产四甲基吡嗪的重组乳酸菌的构建方法，其特征在于，所述的构建方法步骤如下：

1）将核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的乙偶姻操纵子基因片段，插入到质粒pMG36e载体上的Xba I 和Pst I限制性酶切位点之间，使核苷酸序列位于启动子的下游并受其调控，构建重组表达质粒pMG36e-ALS；

2）用步骤2）得到的重组表达质粒转化大肠杆菌感受态细胞，获得初步重组菌，并提取初步重组菌中的重组质粒；

3）用步骤3）提取的重组质粒转化乳酸菌感受态细胞，得到产四甲基吡嗪的重组乳酸菌。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的大肠杆菌感受态细胞为E.coilMC1061。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的乳酸菌感受态细胞为NZ9000。

5.使用如权利要求1所述的产四甲基吡嗪的重组乳酸菌产四甲基吡嗪的方法，其特征在于，所述的方法步骤如下：

1）将产四甲基吡嗪的重组乳酸菌置于发酵罐中进行发酵， 诱导乙偶姻操纵子基因表达，得到发酵液；

2）将得到的发酵液在水浴锅中100℃蒸煮10min，使其发生非酶促的美拉德反应，使乙偶姻与氨反应得到产物四甲基吡嗪。

6.如权利要求1所述的产四甲基吡嗪的重组乳酸菌在重庆小曲生产中的应用。