[发明专利]红树林杆菌及其应用和秸秆纤维素降解方法

说明书

本发明公开了一种红树林杆菌，所述红树林杆菌的菌种保藏编号为CGMCC 23765，所述红树林杆菌的16s rDNA的基因序列如序列表SEQ ID No.1所示。该红树林杆菌应用于对秸秆的纤维素的降解。降解方法为：将红树林杆菌菌株涂布至LB固体平板中，培养2d；用无菌水将培养后的红树林杆菌菌株制成菌悬液；分别取5mL的所述菌悬液接种于含有秸秆的培养基中，并于28℃、120rpm环境下振荡培养；10d后通过过滤的方法将残余秸秆取出，用蒸馏水和稀盐酸溶液冲洗去除无机盐以及秸秆上附着的菌体和CaCOsubgt;3/subgt;沉淀；80℃烘干至恒重，以失重法计算秸秆降解率。本发明的红树林杆菌具有高耐热能力、诱导产酶速度快和降解能力强等优点，对用于开发农业秸秆降解菌剂具有重要意义。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种红树林杆菌及其应用和秸秆纤维素降解方法。

背景技术

纤维素是地球上最丰富的可再生资源，经微生物代谢处理后，可以转化为能源、饲料及化工原料，也是生态系统碳循环的重要环节之一。自然界中存在很多能够降解纤维素的真菌和细菌，它们能够分泌多种纤维素酶类，如β-葡聚糖苷酶、内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、过氧化物酶和酯酶等，并已经在食品、饲料、医药、纺织、洗涤剂和造纸工业等诸多领域开展工业应用。

另外，农业种植产生了大量秸秆废弃物。随着禁止秸秆焚烧政策的实施，需要新的环境友好型的方法来处理这些秸秆废弃物。相对于化学手段，基于纤维素酶或纤维素降解菌的生物处理手段对环境造成污染更低，但因微生物法通常用酶量大、成本高，目前尚难以广泛应用与秸秆废弃物的处理。因此，仍需从特殊生态环境中筛选产量高、分解能力强、适应范围广的纤维素降解菌，进而降低工业应用的成本。

红树林是热带、亚热带陆海交汇的海湾河口潮间带特有的木本植物群落。由于红树林区域土壤中含有大量纤维素、木质素和几丁质等大分子有机物，因此红树林土壤中的许多微生物，特别是真菌和放线菌，均可以产生各种纤维素降解酶。因此，红树林生态环境是重要的微生物菌种资源库，从红树林生态环境中筛选高效纤维素降解菌，具有较高的研究和工业应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用红树林杆菌降解秸秆纤维素的方法，以解决现有技术中的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明具体提供下述技术方案：

一种红树林杆菌，所述红树林杆菌的菌种保藏编号为CGMCC23765，所述红树林杆菌的16s rDNA的基因序列如序列表SEQ ID No.1所示。

作为本发明一种优选的方案，所述红树林杆菌在培养基上培养48h后，H17菌落呈圆形，乳白色隆起、边缘整齐光滑，革兰氏染色呈阴性。

作为本发明一种优选的方案，所述红树林杆菌在纤维素培养基上培养两天后，经刚果红染色显示水解圈直径(D)和菌落直径(d)分别为13.70±2.33mm，4.30±0.67mm；D/d值为3.19。

本发明还提供了一种红树林杆菌的应用，应用于对秸秆的纤维素的降解。

作为本发明一种优选的方案，所述秸秆包括小麦秸秆、玉米秸秆、油菜秸秆和水稻秸秆。

本发明还提供了一种利用上述红树林杆菌降的秸秆纤维素降解方法，包括如下步骤：

步骤100、将红树林杆菌菌株涂布至LB固体平板上或者接种至LB液体培养基中，培养2d；

步骤200、用无菌水将培养后的红树林杆菌菌株制成菌悬液；

步骤300、分别取5mL的所述菌悬液接种于含有秸秆的液体培养基中，并于28℃、120rpm环境下振荡培养；

步骤400、10d后将残余秸秆过滤出来，用蒸馏水和稀盐酸溶液冲洗去除无机盐以及秸秆上附着的菌体和CaCO₃沉淀；