[发明专利]一种提高霉菌物脱氢转化率的方法

说明书

本发明提供了一种提高霉菌物脱氢转化率的方法。本发明的提高霉菌物脱氢转化率的方法，包括如下步骤：S1：将简单节杆菌依次接种至梯度霉菌物浓度的培养基中进行驯化，得到驯化简单节杆菌；S2：采用驯化简单节杆菌对霉菌物进行脱氢，得到霉菌脱氢物。本发明的方法通过梯度霉菌物浓度对简单节杆菌进行驯化，从而增强了简单节杆菌对霉菌物毒性的抗性，提高了霉菌物脱氢转化率；上述方法操作简单、驯化时间短，驯化简单节杆菌的稳定性好，霉菌物转化率高，特别适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其是涉及一种提高霉菌物脱氢转化率的方法。

背景技术

糖皮质激素是机体内极为重要的一类调节分子，对机体的发育、生长、代谢以及免疫功能等起着重要的调节作用，是机体应激反应最重要的调节激素，也是临床上使用最为广泛而有效的抗炎和免疫抑制剂。目前，临床常见的糖皮质激素类药物包括泼尼松、甲泼尼松、倍他米松、丙酸倍氯米松、泼尼松龙、氢化可的松、地塞米松等，该类药物具有抗炎、抗毒、抗过敏、抗休克、非特异性抑制免疫及退热作用等多种作用，可以防止和阻止免疫性炎症反应和病理性免疫反应的发生。

霉菌脱氢物是糖皮质激素的重要中间体，主要合成方法包括化学合成法和微生物合成法。化学合成法普遍存在工艺复杂、合成路线长、收率低等问题；相对于化学合成法，微生物合成法具有反应条件温和、污染小、转化率相对较高等优势,从而有利于环境保护并降低生产成本。然而，在微生物合成法中，如何保持甚至提高菌种的脱氢转化特性，一直是业内的一个技术难点。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高霉菌物脱氢转化率的方法，其能够增强简单节杆菌对霉菌物毒性的抗性，并且稳定地提高霉菌物脱氢转化率。

本发明提供一种提高霉菌物脱氢转化率的方法，包括如下步骤：

S1：将简单节杆菌依次接种至梯度霉菌物浓度的培养基中进行驯化，得到驯化简单节杆菌；

S2：采用驯化简单节杆菌对霉菌物进行脱氢，得到霉菌脱氢物。

本发明的方法利用霉菌物浓度递增的一系列培养基对简单节杆菌进行诱导培养，有效克服了现有简单节杆菌在传代过程中霉菌物脱氢等优良特性丢失等问题，同时提高了该菌种对霉菌物的抗毒性，特别是显著且稳定地提高了霉菌物脱氢转化率。

在本发明中，梯度霉菌物浓度的培养基指的是含有不同霉菌物浓度的一系列培养基，霉菌物浓度为霉菌物的质量浓度；可以理解，驯化时是将简单节杆菌从最低霉菌物浓度的培养基中逐级接种至上一级高霉菌物浓度的培养基中。

本发明的方法对梯度霉菌物浓度的范围不作严格限制，只要简单节杆菌能够在各梯度霉菌物浓度的培养基中生长即可；具体地，梯度霉菌物浓度中的最低霉菌物浓度可以为0.01-0.05％，最高霉菌物浓度可以为8-10％。此外，梯度霉菌物浓度可以包括3个以上霉菌物浓度，例如可以包括3-5个霉菌物浓度。

在一实施方式中，梯度霉菌物浓度包括五个霉菌物浓度，五个霉菌物浓度依次为：0.01％≤霉菌物浓度0.05％，0.05％≤霉菌物浓度0.25％，0.25％≤霉菌物浓度0.5％，0.5％≤霉菌物浓度1.0％和1.0％≤霉菌物浓度≤2.0％。

在另一实施方式中，梯度霉菌物浓度包括五个霉菌物浓度，五个霉菌物浓度依次为：0.05％≤霉菌物浓度0.25％，0.25％≤霉菌物浓度1.25％，1.25％≤霉菌物浓度2.5％，2.5％≤霉菌物浓度5.0％和5.0％≤霉菌物浓度≤7.0％。

在再一实施方式中，梯度霉菌物浓度包括五个霉菌物浓度，五个霉菌物浓度依次为：0.5％≤霉菌物浓度2.5％，2.5％≤霉菌物浓度5.0％，5.0％≤霉菌物浓度7.0％，7.0％≤霉菌物浓度9.0％和9.0％≤霉菌物浓度≤10.0％。