[发明专利]桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法

说明书

本发明公开了一种桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法，包括如下步骤：采用萃取剂对桑仁清肺口服液样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷和橙皮苷同时进行检测；色谱柱为HSS T3色谱柱；流动相A为乙腈+0.2％磷酸，流动相B为0.2％磷酸，并对梯度洗脱程序进行了摸索。方法简便快速、分离效果好，测定精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，色谱峰峰形良好，既达到中国兽药典的要求，又节省时间、试剂。

技术领域

本发明涉及一种桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法，属于兽药中有效成分检测领域。

背景技术

这里的陈述仅提供与本发明相关的背景技术，而不必然地构成现有技术。桑仁清肺口服液为中兽药成方制剂，收载于《兽药国家标准(2017年版)中药卷》p233-234，处方为：桑白皮100g，知母80g，苦杏仁80g，前胡100g，石膏120g，连翘120g，枇杷叶60g，海浮石40g，甘草60g，橘红100g，黄芩140g；以上11味，加水煎煮2次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.02，冷藏24小时，滤过，滤液加苯甲酸适量，加水至1000mL，搅匀，分装，灭菌即得，为棕黄色至棕褐色的液体。具有清肺止咳平喘的功效，主治肺热咳喘。广泛应用于集约化养禽企业。

桑仁清肺口服液质量标准中有11味药，主要对甘草(甘草酸铵)、黄芩(黄芩苷)、连翘(连翘苷)、前胡(白花前胡甲素)进行薄层色谱鉴别，对黄芩进行含量测定。

国家标准方法的薄层色谱检测方法中，斑点受环境温湿度和人为操作的影响大，斑点常常不清晰，结果不易判定，而且费时、费试剂，在实际检验工作中发现层析用的展开剂毒性大，例如：石油醚，乙酸乙酯，丁酮，甲醇，三氯甲烷等，对实验人员的伤害比较大。而且操作繁琐，用时较多。

另外，桑仁清肺口服液的薄层色谱检测前期准备复杂，需要展开，晾干，检视查看结果等多个步骤，费时费力，而且受环境温湿度等因素的干扰比较大，边缘效应等，薄层斑点有时方法难以判别，重现性差。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种桑仁清肺口服液中有效成分的同时测定方法。

为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：

一种桑仁清肺口服液中有效成分的同时测定方法，包括如下步骤：采用萃取剂对桑仁清肺口服液样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷和橙皮苷同时进行检测；

超高效液相色谱的检测波长为205nm、229nm、252nm、277nm和348nm；色谱柱为HSST3色谱柱；流动相A为乙腈+0.2％磷酸，流动相B为0.2％磷酸；

梯度洗脱程序为：0-2min，A的体积分数维持在10％；2-3min，A的体积分数由10％变为12％；3-9min，A的体积分数维持在12％；9-12min，A的体积分数由12％变为20％；12-20min，A的体积分数维持在20％；20-26min，A的体积分数由20％变为30％；26-30min，A的体积分数维持在30％；30-33min，A的体积分数由30％变为38％；33-36min，A的体积分数维持在38％；36-38min，A的体积分数由38％变为45％；38-42min，A的体积分数由45％变为65％；42-44min，A的体积分数维持在65％；44-45min，A的体积分数由65％变为10％；45-48min，A的体积分数维持在10％。

上述本发明的一种或多种实施例取得的有益效果如下：