[发明专利]一种黄花草木樨中香豆素的提取方法及其应用

权利要求书

1.一种黄花草木樨中香豆素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)向黄花草木樨粉末中加入乙醇溶液，在超声辅助的条件下进行提取，过滤、合并提取液，于40～55℃条件下，减压浓缩成浸膏状，即得粗提物1；

(2)加蒸馏水分散粗提物1，用石油醚、乙酸乙酯依次萃取，各萃取2～3次，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩干燥得粗提物2；

(3)将粗提物2吸附在硅胶粉上制样，然后干法上样，进行硅胶柱层析；以石油醚和乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，收集各洗脱液，经薄层色谱分离，合并相同的组分，浓缩干燥至固体，得到浓缩固体1、浓缩固体2、浓缩固体3，4℃保存，备用；

(4)用无水乙醇分别溶解所述浓缩固体1、浓缩固体2和浓缩固体3，于78℃条件下回流30min，随后冷却至室温，待晶体析出，过滤，用冰乙醇冲洗，三种浓缩固体的操作方法相同，得到三种晶体析出物，分别为香豆素、东莨菪内酯、滨蒿内酯。

2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)黄花草木樨粉末的粒径为60～80目；乙醇溶液的体积分数为50％～90％；草木樨与乙醇提取液的料液比为1kg：15～20L。

3.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)超声提取时的超声时间为50～60min，超声功率为200～400W，提取温度为50～60℃，提取次数为2～3次。

4.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(2)萃取时，石油醚与粗提物1水溶液的体积比为2～3：1；乙酸乙酯与粗提物1水溶液的体积比为2～3：1。

5.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)硅胶粉的粒径为200～300目，粗提物2与硅胶粉的质量比为1～2：100；梯度洗脱时，石油醚和乙酸乙酯混合溶剂的体积配比分别为100:1、50:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5:1、5:2、1:1、3:5。

6.一种香豆素包合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取权利要求1所得香豆素溶解在无水乙醇中，形成香豆素乙醇饱和溶液，备用；

(2)将羟丙基-β-环糊精溶解在水溶液中，形成羟丙基-β-环糊精饱和溶液，超声10～30min后，在温度为40～60℃的条件下，以1500r/min的速度搅拌，同时加入香豆素乙醇饱和溶液，继续搅拌2h，浓缩至无乙醇味，得到包合物的浓缩液；所述包合物的浓缩液中香豆素和羟丙基-β环糊精的摩尔比为1：1～4；

(3)将包合物的浓缩液冷冻24h后，用冰乙醇洗涤，冷冻干燥后，得香豆素包合物粉末。

7.如权利要求1所述的提取方法提取的香豆素在抑制农作物病原真菌活性中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，所述的农作物病原真菌为芝麻茎点枯病病原菌菜豆壳球孢。

9.如权利要求6所述的制备方法制备的香豆素包合物在制备抑制芝麻茎点枯病药剂中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，所述香豆素包合物的浓度为0.8～1.6mg/L。