[发明专利]一种组培杨树品种‘森海2号’的方法

说明书

本发明涉及植物组培领域，具体公开了一种组培杨树品种‘森海2号’的方法，包括如下步骤：S1、将‘森海2号’无菌叶片沿垂直主叶脉方向分为两段，取近叶柄段剪去边缘作为外植体接入诱导培养基，诱导培养出愈伤组织，得到带有愈伤组织的叶片；S2、将步骤S1所述带有愈伤组织的叶片转至分化培养基，分化培养出丛生苗；S3、将长至1.0‑1.5cm高的丛生苗转至生根培养基进行生根培养，获得‘森海2号’组培苗。本发明主要针对杨树良种‘森海2号’，综合考虑组培过程中的各个环节，优化组织培养条件，建立了一套适用于‘森海2号’高效组织培养体系。

技术领域

本发明涉及植物组培领域，具体涉及一种组培杨树品种‘森海2号’的方法。

背景技术

杨树良种‘森海2号’是通过中国林科院林业研究所胡建军等人人工控制授粉选育而成，2021年获得良种审定通过的品种(编号：国S-SV-PS-001-2021)。其父本为青杨，母本为美洲黑杨。青杨派和黑杨派的亲缘关系较近，杂交可配性高，是非常优良的杂交组合(胡斌，樊军锋，高建设，等.美洲黑杨与青杨、川杨和卜氏杨人工杂交及杂种苗生长和抗病性状测定[J].浙江林学院学报，2009，26(6)：778-783.)。‘森海2号’具有优良的速生性和材性，但是抗盐碱和抗病虫害能力较差。组培再生系统是其种质资源保存利用和基因转化研究的基础，杨树‘森海2号’高效组培再生系统的建立，可为通过根癌农杆菌介导法将耐盐碱基因或抗虫基因导入‘森海2号’组内以获得优良新品种奠定基础。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何高效地组织培养杨树良种‘森海2号’。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种组培(组织培养)杨树品种‘森海2号’的方法，包括如下步骤：

S1、将‘森海2号’无菌叶片沿垂直主叶脉方向分为两段，取近叶柄段剪去边缘作为外植体接入诱导培养基，诱导培养出愈伤组织，得到带有愈伤组织的叶片；

S2、将步骤S1所述带有愈伤组织的叶片转至分化培养基，分化培养出丛生苗；

S3、将长至1.0-1.5cm高的丛生苗转至生根培养基进行生根培养，获得‘森海2号’组培苗；

所述诱导培养基为以MS基本培养基为基础培养基，向该基础培养基中添加6-BA、ZT、IBA和2,4-D得到的固体培养基，诱导培养基中6-BA的浓度为0.5mg·L^-1、ZT的浓度为0.25mg·L^-1、IBA的浓度为0.25mg·L^-1、2,4-D的浓度为1.0mg·L^-1；

所述分化培养基为以MS基本培养基为基础培养基，向该基础培养基中添加6-BA、ZT和IBA得到的固体培养基，分化培养基中6-BA的浓度为0.5mg·L^-1、ZT的浓度为0.25mg·L^-1、IBA的浓度为0.25mg·L^-1；

所述生根培养基为以1/2MS基本培养基为基础培养基，向该基础培养基中添加IBA和NAA得到的固体培养基，生根培养基中IBA的浓度为0.05mg·L^-1、NAA的浓度为0.02mg·L^-1。

上述方法中，所述外植体大小优选为(0.8～1.2)cm×(0.8～1.2)cm。

上述方法中，所述诱导培养的培养条件为温度24-25℃，黑暗。

上述方法中，所述诱导培养，每2周继代一次。

上述方法中，所述诱导培养，进行3-4周。

上述方法中，所述分化培养和所述生根培养的培养条件为温度24-25℃，光照强度1600-2000lux，光照16h/黑暗8h。

上述方法中，所述分化培养，进行3-4周。