[发明专利]一种快速获取白参菌PCR产物的方法

权利要求书

1.一种快速获取白参菌PCR产物的方法，其特征在于：以白参菌的子实体作为原料，在冰浴下研磨预处理制备子实体上清液，采用2xT5 Direct PCR Mix(Plant)试剂盒对子实体上清液进行PCR反应，所述PCR反应具体是先进行预变性、然后进入变性、退火和延伸的循环中，循环结束后进行终延伸，循环中退火温度控制为56℃，退火时间为10s，循环次数为42-45次。

2.如权利要求1所述的一种快速获取白参菌PCR产物的方法，其特征在于：所述循环过程中变性温度为98℃，时间为10s，退火温度控制为56℃，退火时间为10s，延伸温度为72℃、时间为20-30s。

3.如权利要求1或2所述的一种快速获取白参菌PCR产物的方法，其特征在于：所述白参菌子实体研磨预处理的冰浴温度为-20℃，研磨时间为2min，研磨结束后，取1研磨后的白参菌子实体浸于ddH₂O中，上下颠倒混匀后，简短离心，研磨后的白参菌子实体与ddH₂O的质量体积比为1mg：5 uL。

4.如权利要求1-4任一项所述的一种快速获取白参菌PCR上述白参菌子实体上清液添加2xT5 Direct PCR Mix(Plant)试剂盒进行PCR扩增， PCR反应体系中包括：ddH₂O 18 µL，2xT5 Direct PCR Mix(Plant) 25µl，白参菌子实体上清液为2uL，浓度为10ng• µL^-1引物4µL，其中，前引物与后引物各 2 µL，置于PCR 仪上进行PCR扩增。

5.一种快速获得白参菌PCR产物的方法，其特征在于，按如下步骤进行：

（1）在-20℃的冰浴下，采用40-60rpm对白参菌子实体进行研磨，研磨时间为2min，研磨结束后，取1研磨后的白参菌子实体浸于ddH₂O中，上下颠倒混匀后，简短离心得上清液吧，研磨后的白参菌子实体与ddH₂O的质量体积比为1mg：5 uL，添加2xT5 Direct PCR Mix(Plant)试剂盒进行PCR扩增， PCR反应体系中包括：ddH₂O 18 µL，2xT5 Direct PCR Mix(Plant) 25µl，浓度为10ng• µL^-1引物4 µL，其中，前引物与后引物各 2 µL，研磨后的子实体上清液2uL，置于PCR 仪上进行PCR扩增；

（2）控制反应条件如下：先在98℃下变性3min，然后进入循环，循环具体是98℃下变性10s，然后在56℃下退火10s，再在72℃下延伸20-30s，经42-45次循环后，再在72℃下延伸3-5min。