[发明专利]一种植物促生菌的液体发酵方法

说明书

本发明公开了一种植物促生菌的液体发酵方法。本发明植物促生菌的液体发酵方法，包括如下步骤：S1、在通气条件下，将发酵培养液灭菌后接入植物促生菌进行第一次培养；S2、在第一培养结束后的培养体系中接入蔬菜苗的根系分泌物提取液进行第二次培养；S3、在第二次培养结束后的培养体系中添加补料液，降低通气量进行第三次培养；S4、关闭通气，对第三次培养结束后的培养体系进行第四次培养，得到发酵液。本发明所制得的发酵液中活菌数可达到10^10CFU/mL，芽孢率80％以上，显著提高了菌剂产品质量和货架期。

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，具体涉及一种植物促生菌的液体发酵方法。

背景技术

农作物的生长受到土壤肥力、土壤微生物、病虫害等外部环境因素的影响。土壤肥力是农作物赖以生存的物质基础，是作物获得高产的必备因素。然后，过量的使用氮、磷等肥料最终导致土壤中矿物质元素富集、重金属污染、土壤酸化和板结，作物能吸收利用的有效矿物质元素的比例下降，从而影响作物生长，也给生态环境质量带来负面影响。特别是迅速发展的大棚蔬菜，几乎没有雨水淋溶作用，使得磷的利用率进一步下降。另外，植物病原微生物是引起植物病害的主要因素，常造成组织病变或死亡。目前，常用的防治手段主要有物理防治、化学防治、生物防治和栽培防治等，其中，化学防治所起到的效果虽然显著，但容易污染环境、增强病原菌的抗逆性，严重危害人畜健康。

随着现代生物技术的迅速发展，具有生防能力的微生物肥料或菌剂成为一种理想的新型复合肥料。微生物肥料以生防菌为中心，使用天然基质进行混合，具有无毒、无害、环保、靶向性强等优点。然而，植物促生生物菌肥的大规模开发的前提是需要获得大量的植物促生菌。现有技术的植物促生菌发酵的产量较低，生产成本较高，并不能满足正常对植物促生菌使用的需求，而且要提高促生菌剂的保质期，需要让更多的促生菌处在芽孢状态。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物促生菌的液体发酵方法，该方法不仅生物获得量高，还大大提高了芽孢率，使促生菌剂保存期延长，而且成本更低。

本发明提供的一种植物促生菌的液体发酵方法，包括如下步骤：

S1、在通气条件下，将发酵培养液灭菌后接入植物促生菌进行第一次培养；

S2、在第一培养结束后的培养体系中接入蔬菜苗的根系分泌物提取液进行第二次培养；

S3、在第二次培养结束后的培养体系中添加补料液，降低通气量进行第三次培养；

S4、关闭通气，对第三次培养结束后的培养体系进行第四次培养，得到发酵液。

上述的方法中，所述植物促生菌可为芽孢杆菌；所述植物促生菌具体可为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis Z48，其保藏编号为CGMCC No.7749；

或，贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Z48；

或，贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)C812、甲基营养化芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)LPL-117和贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Z48(菌落形成单位比为1：1：1)；

或，贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)L-S60、甲基营养化芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)LPL-117和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloidquefaciens)L-H15(CGMCC No.10044)(菌落形成单位比为1：1：1)。