[发明专利]一种凤梨离体组织诱导培养方法

说明书

本发明公开了一种凤梨离体组织诱导培养方法。该方法包括以下技术步骤：(1)针刺破坏冠芽顶端生长点；(2)0.01～0.05％的甲·灭·敌草隆抑制凤梨植株；(3)芸苔素内酯和激动素混合药剂诱导冠芽分蘖；(4)施入水溶肥促进分蘖芽壮苗培育；(5)分蘖芽获得。本发明方法通过在凤梨原体上通过诱导培养多个侧芽，快速获得大量凤梨离体组织材料作为外植体，以加快凤梨组培繁育速度。

技术领域

发明属于作物繁育技术领域，具体是一种凤梨离体组织诱导方法。

背景技术

凤梨又称菠萝、草菠萝、地菠萝，是一种热带水果并可作为观赏的作物。常用分株、芽栽、块茎、组织培养等方式繁殖。种苗质量是凤梨栽培的关键，通过组培培养技术对凤梨优良品种进行繁育是获得大量不携带病原物的优质种苗的重要途径，对保证种苗质量及提高生产效率具有积极意义。

凤梨的组培繁育常采用冠芽、吸芽或腋芽作为外植体诱导腋芽萌发或通过愈伤组织分化获得组培苗，如一种凤梨组织培养苗的制备方法(CN201911175032.4)、一种凤梨的组织培养方法(2017113866114)、陈华蕊等《维多利亚凤梨组培快繁技术研究》中国南方果树、崔小丽等《金凤梨组培快繁技术研究》热带农业科学、张瑛等《“台农17号”凤梨组培快繁技术研究》广西农业科学。这些方法主要是通过凤梨芽作为外植体，在培养瓶内诱导愈伤组织形成苗或芽直接分化成苗，但凤梨芽数量较少，正常情况下，1个凤梨仅有1个冠芽，因此采用诱导冠芽、侧芽萌发或诱导愈伤组织形成苗的方式存在培养材料少，培养时间长等问题，极大影响凤梨的繁育速度。

发明内容

针对以上问题，本发明提供一种凤梨离体组织诱导培养方法，通过在凤梨冠芽上诱导培养多个侧芽，快速获得大量凤梨离体组织材料作为外植体的方法，本发明可加快凤梨组培繁育速度。

本发明通过以下技术方案实现：

一种凤梨离体组织诱导培养方法，包括以下步骤：

(1)破坏冠芽顶端生长点：用针从凤梨冠芽顶端刺入，刺伤冠芽顶端生长点来抑制冠芽顶端生长点生长；

(2)抑制凤梨植株：对凤梨植株喷施浓度为0.01～0.05％的甲·灭·敌草隆；

(3)诱导冠芽分蘖：10～15天后，用浓度为0.01％芸苔素内酯的2000～3000倍液和浓度为2～3mg/L激动素混合药剂对冠芽进行喷施；芸苔素内酯和激动素质量比为1.5～2：1；

(4)分蘖芽壮苗培育：混合药剂喷施完成后，对凤梨植株用水肥滴灌或浇灌方式进行催芽，肥料以氮肥为主，钾肥、磷肥为辅的水溶性肥，每隔8～12天施一次；经过30～45天凤梨顶端冠芽的侧芽萌发长大；

(5)分蘖芽获得：分蘖芽生长至高度3～5cm后，将凤梨果实顶端整个切下，再将分蘖芽切成单个小芽；消毒处理后放入培养基进行培养。

作为技术方案的优选，步骤(1)中，采用催花结果的凤梨，当凤梨果实上的冠芽长至2～5cm高时，用尖针从凤梨冠芽顶端中心位置刺入，破坏凤梨冠芽的顶端生长点。

作为技术方案的优选，步骤(2)中，破坏凤梨冠芽顶端生长点10～15天后，用喷雾器对凤梨植株喷施浓度为0.01～0.05％的甲·灭·敌草隆，喷施需形成雾状，植株叶片表面粘附药剂，叶片沾湿即可，但不形成水滴，避免剂量过多的药剂影响植株生长。

作为技术方案的优选，步骤(3)中，混合药剂对冠芽喷施用量为每667m²用量为12～16kg混合药剂。

步骤(4)中，肥料以氮肥为主，钾肥、磷肥为辅的水溶性肥，每隔8～12天施一次，每次用量为每667m²用1.5～2kg；水溶性肥的氮含量要求25～45％，钾和磷的含量在5～15％。