[发明专利]一种凤梨离体组织诱导培养方法

权利要求书

1.一种凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)破坏冠芽顶端生长点：用针从凤梨冠芽顶端刺入，刺伤冠芽顶端生长点来抑制冠芽顶端生长点生长；

(2)抑制凤梨植株：对凤梨植株喷施浓度为0.01～0.05％的甲·灭·敌草隆；

(3)诱导冠芽分蘖：10～15天后，用浓度为0.01％芸苔素内酯的2000～3000倍液和浓度为2～3mg/L激动素混合药剂对冠芽进行喷施；芸苔素内酯和激动素质量比为1.5～2:1；

(4)分蘖芽壮苗培育：混合药剂喷施完成后，对凤梨植株用水肥滴灌或浇灌方式进行催芽，肥料以氮肥为主，钾肥、磷肥为辅的水溶性肥，每隔8～12天施一次；经过30～45天凤梨顶端冠芽的侧芽萌发长大；

(5)分蘖芽获得：分蘖芽生长至高度3～5cm后，将凤梨果实顶端整个切下，再将分蘖芽切成单个小芽；消毒处理后放入培养基进行培养。

2.根据权利要求1所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，步骤(1)中，采用催花结果的凤梨，当凤梨果实上的冠芽长至2～5cm高时，用尖针从凤梨冠芽顶端中心位置刺入，破坏凤梨冠芽的顶端生长点。

3.根据权利要求1所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，步骤(2)中，破坏凤梨冠芽顶端生长点10～15天后，用喷雾器对凤梨植株喷施浓度为0.01～0.05％的甲·灭·敌草隆，喷施需形成雾状，植株叶片表面粘附药剂，叶片沾湿即可，但不形成水滴。

4.根据权利要求1或3所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，所述甲·灭·敌草隆喷施浓度为0.03％。

5.根据权利要求1所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，步骤(3)中，混合药剂对冠芽进行喷施用量为每667m²用12～16kg混合药剂。

6.根据权利要求1所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，步骤(4)中，肥料以氮肥为主，钾肥、磷肥为辅的水溶性肥，每隔8～12天施一次，每次用量为每667m²用1.5～2kg；水溶性肥的氮含量要求25～45％，钾和磷的含量在5～15％。

7.根据权利要求1所述的凤梨离体组织诱导培养方法，其特征在于，步骤(5)中，将获得的凤梨丛生小芽剥离外层2～4片叶子，有病斑的叶片或叶尖萎蔫的叶片必须剥离，用75％的酒精浸泡5～10s，接着放入0.1％的升汞中浸泡10～12min，用无菌水冲洗3～4次，再放入培养基培养。