[发明专利]一种酶解提取制备千金藤素的方法

权利要求书

1.一种千金藤素的提取制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至10～60目，加入药材重量1～3倍的水浸泡8-30小时；

2)酶解：加入药材重量0.3％～1.5％混合生物酶酶解1～5小时，所述混合生物酶由纤维素酶和α-淀粉酶组成，二者的质量比为1～5:1；所述酶解在40℃～55℃，pH 5.0～7.0条件下进行；

3)提取：加入药材重量4～10倍的50％～95％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，浓缩后得稠膏；

4)酸溶、碱沉：往稠膏中加入1～4倍稠膏重量的2wt％～10wt％盐酸或硫酸水溶液，加热、搅拌、溶散后冷却至室温，过滤，得酸性滤液，再用2wt％～15wt％的NaOH溶液或KOH溶液调节pH至9～10，静置沉淀8-30小时，过滤，得到的固体为千金藤素粗品；

5)重结晶：千金藤素粗品在有机溶剂中重结晶，得千金藤素纯品。

2.如权利要求1所述的千金藤素的提取制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至30～40目，加入药材重量1.5～2倍的水浸泡12-24小时；

2)酶解：加入药材重量0.6％～1％混合生物酶酶解1～3小时，所述混合生物酶由纤维素酶和α-淀粉酶组成，二者的质量比为2～4:1；所述酶解在48℃～52℃，pH 5.8～6.2条件下进行；

3)提取：加入药材重量5～8倍的70％～90％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，浓缩后得稠膏；

4)酸溶、碱沉：往稠膏中加入2～3倍稠膏重量的5wt％～8wt％盐酸或硫酸水溶液，加热、搅拌、溶散后冷却至室温，过滤，得酸性滤液，再用5wt％～10wt％的NaOH溶液或KOH溶液调节pH至9～10，静置沉淀12-20小时，过滤，得到的固体为千金藤素粗品；

5)重结晶：千金藤素粗品在有机溶剂中重结晶，得千金藤素纯品。

3.如权利要求2所述的千金藤素的提取制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至30～40目，加入药材重量2倍的水浸泡24小时；

2)酶解：加入药材重量0.8％混合生物酶酶解3小时，所述混合生物酶由纤维素酶和α-淀粉酶组成，二者的质量比为3:1；所述酶解在49℃～51℃，pH 5.9～6.1条件下进行；

3)提取：加入药材重量6倍的80％甲醇回流提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，浓缩后得稠膏；

4)酸溶、碱沉：往稠膏中加入3倍稠膏重量的6wt％盐酸或硫酸水溶液，加热、搅拌、溶散后冷却至室温，过滤，得酸性滤液，再用8wt％的NaOH溶液或KOH溶液调节pH至9～10，静置沉淀20小时，过滤，得到的固体为千金藤素粗品；

5)重结晶：千金藤素粗品在有机溶剂中重结晶，得千金藤素纯品。

4.如权利要求1～3中任一项所述的千金藤素的提取制备方法，其特征在于，所述纤维素酶的酶活单位为10000U/g，所述α-淀粉酶的酶活单位为20000U/g。

5.如权利要求1～3中任一项所述的千金藤素的提取制备方法，其特征在于，其中步骤5)中所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、苯中的任意一种。