[发明专利]一种银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法

权利要求书

1.一种银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，包括银杏叶颗粒中总黄酮醇苷含量测定的方法和银杏叶颗粒中萜类内酯含量测定的方法，

其中，所述银杏叶颗粒中总黄酮醇苷含量测定的方法包括：使用大孔吸附树脂柱对银杏叶颗粒进行前处理，得到待测成分；待测成分经酸化水解，得到黄酮苷元，使用HPLC法进行测定；

所述银杏叶颗粒中萜类内酯含量测定的方法包括：使用硅藻土柱对银杏叶颗粒进行前处理，得到待测成分；以60-90％甲醇溶液作为供试品和对照提取物的溶剂，使用HPLC-ELSD法进行测定；

所述银杏叶颗粒中总黄酮醇苷含量测定的方法具体包括：

S1、精确称取银杏叶颗粒的粉末，加溶剂水并配合超声溶散，过大孔吸附树脂柱，依次用水洗脱剂、乙醇洗脱剂洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，得到待测成分；

S2、向待测成分中加入甲醇-25％盐酸溶液的混合溶液进行酸化水解，并使用甲醇定容，得到供试品溶液；

S3、以槲皮素的甲醇溶液作为对照品溶液，在相同的色谱条件下，分别测定对照品溶液和供试品溶液中黄酮苷元的峰面积，采用外标法以校正因子计算供试品溶液中总黄酮醇苷的含量；

其中，所述黄酮苷元包括槲皮素、山柰酚和异鼠李素；

总黄酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰酚含量+异鼠李素含量)*2.51；

所述大孔吸附树脂柱包括型号为HPD-BJQH、AB-8、HPD450、HPD417、HPD500、K17和D101中的任意一种；

所述银杏叶颗粒中萜类内酯含量测定的方法具体包括：

S1、精确称取银杏叶颗粒的粉末，加磷酸盐缓冲液并配合超声溶散，过硅藻土柱，待磷酸盐缓冲液全部吸附于硅藻土后，静置10-20min，使用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，蒸干，得到待测成分；

S2、向待测成分中加入60-90％甲醇溶液并配合超声溶解，使用60-90％甲醇溶液定容，得到供试品溶液；

S3、以银杏叶总内酯提取物的60-90％甲醇溶液作为对照提取物溶液，在相同的色谱条件下，分别测定对照提取物溶液和供试品溶液中各内酯的峰面积，采用外标两点法对数方程分别计算各内酯的含量，内酯含量的总和即为萜类内酯的含量；

其中，所述内酯包括白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C。

2.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，相当于总黄酮醇苷9.6mg的银杏叶颗粒的粉末所对应溶剂水、水洗脱剂、乙醇洗脱剂、甲醇-25％盐酸溶液的混合溶液的量分别为4-6ml、80-120ml、80-120ml和23-27ml；

其中，所述甲醇-25％盐酸溶液的混合溶液中甲醇与25％盐酸溶液的体积比为4:1。

3.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，所述酸化水解时，将溶解有待测成分的甲醇-25％盐酸溶液的混合溶液置于水浴中加热回流30min，迅速冷却至室温，转移至容量瓶使用甲醇稀释定容。

4.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱为C18柱；流动相为体积比为1:1的甲醇-0.4％磷酸溶液的混合溶液；检测波长为360nm；流速为1.0ml/min；进样量为10μl。

5.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，相当于萜类内酯7.2mg的银杏叶颗粒的粉末所对应磷酸盐缓冲液、硅藻土、乙酸乙酯的量分别为10-15ml、14-18g和80-120ml。

6.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱为C18柱；流动相为体积为1：15：84的正丙醇-四氢呋喃-水的混合溶液；检测器为蒸发光检测器；进样量为5-20μl。

7.根据权利要求1所述的银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法，其特征在于，所述银杏叶颗粒中总黄酮醇苷含量测定时，对照品溶液中每1ml甲醇中含30μg对照品；

所述银杏叶颗粒中萜类内酯含量测定时，对照提取物溶液中每1ml60-90％甲醇溶液含2.5mg对照提取物。