[发明专利]一种诺卡菌特异性抗原蛋白、血清学诊断试剂盒及其应用

说明书

本发明属于生物医学和诊断技术领域，具体涉及一种诺卡菌特异性抗原蛋白、血清学诊断试剂盒及其应用。本发明通过对诺卡菌全基因组序列分析，选择诺卡菌特异性基因，通过克隆表达分析，确定该蛋白为诺卡菌特异性的免疫显性蛋白，应用全菌血清进一步验证了该蛋白能够特异性的识别诺卡菌感染的小鼠和人血清，从而表明其是一种新的具有高度诊断价值和应用前景的抗原蛋白。采用本发明技术方案制备相应诊断产品，能够显著节约临床鼻疽诺卡菌诊断的时间；且检测方法简单易学，无需专业技术或经验，其应用范围广，具有良好的实际应用之价值。

技术领域

本发明属于生物医学和诊断技术领域，具体涉及一种诺卡菌特异性抗原蛋白、血清学诊断试剂盒及其应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

诺卡菌是一种需氧、部分抗酸以及革兰氏阳性杆菌，其被认为是急性或慢性肺部感染或化脓性疾病患者中较为常见的条件致病菌。其中，鼻疽诺卡菌(Nocardiafarcinica)是引起肺诺卡菌病的最常见病原体之一。将诺卡菌鉴定到种水平在临床诊治中具有重要意义，因为不同种诺卡菌具有不同的耐药谱。此外，鼻疽诺卡菌与分枝杆菌等在表型上有一些相似之处，这也有可能导致对感染病原体的误判，进而导致误诊情况的发生。而对于诺卡菌病患者来说，误诊则会使得病程延误或治疗不当，从而导致疾病的高死亡率。

临床上现有的诺卡菌诊断主要是分离培养，耗时耗力，一般需要至少一周时间，严重耽误临床及时用药。此外，该细菌分离培养难度较高，一般非常有经验的专业技术人员才能容易分离到细菌，基层医院分离培养技术不够熟练，及其容易分离培养失败，造成检验诊断报告错误，耽误疾病治疗最佳时间。

发明内容

因此，本发明的目的是提供一种诺卡菌特异性抗原蛋白、血清学诊断试剂盒及其应用。本发明首次发现一种鼻疽诺卡菌的免疫原性蛋白，应用疑似临床诺卡菌感染病人的血清，通过ELISA等方法检测血清中的抗体，从而达到快速诊断鼻疽诺卡菌感染的目的。

具体地，本发明的技术方案如下所示：

本发明的第一个方面，提供一种诺卡菌特异性抗原蛋白，所述诺卡菌特异性抗原蛋白是如下(a1)或(a2)：

(a1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(a2)由(a1)衍生，且其含有SEQ ID NO.1所示的部分氨基酸序列，即抗原表位多肽。

本发明的第二个方面，提供编码上述诺卡菌特异性抗原蛋白的基因。

本发明的第三个方面，提供含有上述编码基因的重组表达载体和/或含有上述编码基因的转化细胞亦在本发明的保护范围之内。

本发明的第四个方面，提供上述诺卡菌特异性抗原蛋白在制备诺卡菌诊断试剂、诺卡菌诊断试纸和/或诺卡菌诊断试剂盒的应用。

本发明的第五个方面，提供一种诺卡菌诊断试剂、诺卡菌诊断试纸和/或诺卡菌诊断试剂盒，所述诺卡菌诊断试剂、诺卡菌诊断试纸和/或诺卡菌诊断试剂盒包含上述诺卡菌特异性抗原蛋白。

本发明的第六个方面，提供一种检测诺卡菌或诊断诺卡菌感染的方法，所述方法包括：采集受试者血清，采用上述诺卡菌特异性抗原蛋白、诺卡菌诊断试剂、诺卡菌诊断试纸和/或诺卡菌诊断试剂盒进行检测。

上述一个或多个技术方案的有益效果为：

上述技术方案通过对诺卡菌全基因组序列分析，选择诺卡菌特异性基因，通过克隆表达分析，确定该蛋白为诺卡菌特异性的免疫显性蛋白，应用全菌血清进一步验证了该蛋白能够特异性的识别诺卡菌感染的小鼠和人血清，从而表明其是一种新的具有高度诊断价值和应用前景的抗原蛋白。