[发明专利]一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法

权利要求书

1.一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤制备而成：

步骤一、制备原料：按照体积份计，称取间充质干细胞无血清培养基100份、营养添加物10-30份、非渗透性冷冻保护剂4-10份、渗透性冷冻保护剂1-3份；

步骤二、混合：将步骤一中称取的原料依次加入到无菌试剂瓶中，搅拌混合均匀，得到混合液；

步骤三、过滤除菌：将步骤二中的混合液通过0.2μm滤膜进行过滤除菌，转移到新的无菌试剂瓶中，并对无菌试剂瓶中的混合液进行微生物、支原体检测，为阴性合格后备用；

步骤四、存储：对步骤三中装有检测合格混合液的无菌试剂瓶进行密封处理，冷藏存储。

2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述步骤一中非渗透性冷冻保护剂包括羟乙基淀粉、海藻糖、蔗糖、羧甲基纤维素钠中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述步骤一中渗透性冷冻保护剂包括甘油、乙二醇中的一种或两种。

4.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述步骤一中营养添加物包括氨基酸、维生素，其中氨基酸和维生素的体积比为10:2-5。

5.根据权利要求4所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述氨基酸包括缬氨酸、亮氨酸、丙氨酸、谷氨酸、丝氨酸、天门冬氨酸中的一种或几种。

6.根据权利要求4所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述维生素包括维生素C、维生素B6、维生素B12中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞无血清冻存液的制备方法，其特征在于，所述冷藏存储的温度为2-8℃。

8.根据权利要求1-7任一项所述的人脐带间充质干细胞无血清冻存液在人脐带间充质干细胞冻存中的应用。