[发明专利]化学修饰的mRNA转染的皮片或皮瓣及其促进创面愈合的用途

说明书

本发明涉及化学修饰的mRNA(modRNA)转染的皮片或皮瓣及其促进创面愈合的用途。本发明使用modRNA直接转染皮片，发现modRNA可以在皮片中高效表达，将转染modRNA的皮片移植到创面后，显著促进了创面愈合。本发明为modRNA治疗提供了一种简便有效的方法。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及化学修饰的mRNA转染的皮片或皮瓣及其促进创面愈合的用途。

背景技术

糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是全球性最常见的慢性代谢性疾病之一，近年来随着人们生活方式的改变，其患病率呈指数增长，且趋于日益年轻化。据国际糖尿病联盟(IDF,http://www.diabetesatlas.org/)调查显示，2019年全球约4.63亿20-79岁成人患糖尿病(11个人中有1个为糖尿病患者)；预计到2030年，糖尿病患者会达到5.784亿；预计到2045年，糖尿病患者会达到7.002亿。糖尿病难愈合性创面是糖尿病的常见并发症之一，是一种难以痊愈的肢体缺血性溃疡。因其经常伴有严重的感染和慢性炎症，最终可导致患者截肢甚至死亡的严重后果，给患者的健康和生命带来严重的威胁，对家庭、社会造成极为沉重的负担。目前对于糖尿病引起的愈合不良慢性创面的治疗，主要以清创、抗感染及敷料换药等传统治疗方法为主，但这些治疗并不能取得很好疗效，存在着反复感染溃烂，甚至侵蚀损坏骨组织等危害。因此，如何修复糖尿病难愈合性创面仍是一个难题，探索高效、特异的修复糖尿病创面的方法具有重要的临床应用意义。

近年来，随着对mRNA结构的认识不断深入及核酸技术的不断进步，化学合成修饰信使核糖核酸(chemically synthetic modified message RNA,modRNA)兼具稳定性、低免疫原性及良好的蛋白翻译表达能力，是一种新兴的基因载体。modRNA能够有效调控靶细胞的分化、增殖，促进损伤后组织或器官结构及功能的恢复。既往体内外的研究表明，modRNA可以通过瞬时、高效、脉冲式地表达具有生物活性的旁分泌因子，因而，可作为组织修复与再生的一种有效的给药手段。早在2013年，Zangi L及Lui KO等人利用编码VEGF的modRNA来促进心脏祖细胞向血管内皮细胞分化，从而提高心肌细胞的增殖及存活。研究表明皮下注射编码VEGF的modRNA在治疗糖尿病创面愈合和心血管疾病方面显示出巨大的潜力，最新的临床研究表明，modRNA在治疗糖尿病方面具有良好的耐受性和安全性等优点，应用modRNA治疗有希望作为再生方面疾病的重要治疗手段。

然而，通过转染细胞来递送modRNA需要经过皮下点状注射modRNA转染的细胞，过程繁琐。目前未见更简便有效的modRNA递送和治疗方式。

发明内容

本发明第一方面提供一种皮片或皮瓣，所述皮片或皮瓣转染有modRNA。

在一个或多个实施方案中，所述转染的方式为脂质体转染、纳米颗粒介导、粒子轰击、微注射或电穿孔。

在一个或多个实施方案中，所述转染的方式是将皮片或皮瓣浸于含有modRNA的转染液中。

在一个或多个实施方案中，所述modRNA翻译促进创面愈合的蛋白或多肽。在一个优选的实施方案中，所述modRNA为SDF-1α、PDGF、TGF、FGF、EGF、IGF或VEGF modRNA。

在一个或多个实施方案中，所述创面是由切割伤、挫伤、烧伤、化学性灼伤、褥疮或糖尿病导致的皮肤溃疡形成的。

在一个或多个实施方案中，所述皮片为表层皮片、中厚皮片或全厚皮片；所述皮瓣为单纯皮瓣、筋膜皮瓣、复合皮瓣、联合皮瓣或组合组织皮瓣。

本发明第二方面提供一种皮片或皮瓣的处理方法，包含用modRNA转染皮片或皮瓣的步骤。

在一个或多个实施方案中，所述转染的方式为脂质体转染、纳米颗粒介导、粒子轰击、微注射或电穿孔。