[发明专利]一种Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系及其应用

说明书

本发明提供了人Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系，其保藏号为CGMCC NO.45145，本发明从Angptl3敲除的小鼠中提取原代足细胞，慢病毒转染制备永生化的Angptl3敲除的鼠足细胞系，使用Nephrin和WT‑1抗体进行了足细胞的验证，永生化的足细胞可以稳定传30代以上，为研究在肾病综合征中Angptl3基因表达缺失对足细胞保护提供了理想和稳定的细胞系。该细胞系以进行永生化处理，能大量培养传代，培养要求相对较为简单，能够短时间内获得大量的实验用细胞，总体实验周期较短，适合推广。

技术领域

本发明属于生物和医疗技术领域，具体涉及一种Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系及其应用。

背景技术

肾病综合征(nephrotic syndrome，NS)是一组具有类似临床表现，不同病因及病理病变的肾小球疾病构成的临床综合征。可由多种病因引起，分为原发性、继发性和遗传性三大类。许多疾病可引起肾小球毛细血管滤过膜的损伤，导致肾病综合征。肾病综合征发展到后期往往演变为尿毒症，使肾病综合征的危害威胁生命。

Angptl3是一种分泌性糖蛋白，正常情况下主要在肝脏表达，发生肾病综合征时在足细胞中表达增高。研究表明Angptl3是导致肾病综合征的一个很重要的靶点，敲除Angptl3或降低Angptl3的表达可以在很大程度上保护足细胞，减少蛋白尿。

既往对Angptl3的体外研究需要向足细胞中转染质粒来降低其表达，或者从Angptl3敲除的小鼠中直接提取原代足细胞进行培养。但是上述两种方法均有弊端，质粒转染率低，降低Angptl3的表达程度有限；从Angptl3基因敲除的小鼠中直接提取原代足细胞培养周期长，失败率高，并且原代足细胞生长周期有限，需要反复提取。

以上缺点严重影响了对Angptl3的体外研究，需要一种新的Angptl3的体外研究的细胞。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系及其应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供了一种Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系，其保藏号为：CGMCC NO.45145。

本发明的第二方面，提供前述Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系的子代细胞系。

前述的Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系或子代细胞系，能够表达Nephrin蛋白和WT-1蛋白。能够稳定增殖和传代。

本发明第三方面，提供前述的Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系或子代细胞系的用途，为制备肾病综合征细胞模型或制备肾病综合征动物模型。

本发明第四方面，提供前述的Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系或子代细胞系的用途，为制备肾病综合征诊断产品。

本发明第五方面，提供前述的Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系或子代细胞系的用途，为开发肾病综合征相关的生物工程产品。

本发明第六方面，提供前述的Angptl3敲除的鼠永生化足细胞系或子代细胞系的用途，为开发Angptl3缺失相关疾病的生物工程产品。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明从Angptl3敲除的小鼠中提取原代足细胞，慢病毒转染制备永生化的Angptl3敲除的鼠足细胞系，使用Nephrin和WT-1抗体进行了足细胞的验证，永生化的足细胞可以稳定传30代以上，为研究在肾病综合征中Angptl3基因表达缺失对足细胞保护提供了理想和稳定的细胞系。该细胞系以进行永生化处理，能大量培养传代，培养要求相对较为简单，能够短时间内获得大量的实验用细胞，总体实验周期较短，适合推广。

本发明细胞株保藏信息如下：