[发明专利]一种恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN及其衍生产品和应用

说明书

本发明提供了一种恶性疟原虫(P.falciparum)RIFIN多肽8‑RIFIN及其衍生产品和应用，属于生物蛋白质工程技术领域。本发明提供的恶性疟原虫RIFIN多肽8‑RIFIN，氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，来自于恶性疟原虫3D7的RIFIN基因PF3D7_0900200编码的位于243～267aa的RIFIN肽段。多肽8‑RIFIN不仅具有较好的可特异性识别感染恶性疟病人全血的能力，且能够结合免疫抑制性受体LILRB1，这表明本发明的多肽是恶性疟原虫RIFIN蛋白与LILRB1结合的关键区域，为进一步研究恶性疟原虫利用RIFIN蛋白进行免疫逃避的分子机制打下基础。

技术领域

本发明属于生物蛋白质工程技术领域，具体涉及一种恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN及其衍生产品和应用。

背景技术

蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction，PPI)是指两个或两个以上的蛋白质分子通过非共价键形成蛋白质复合体(protein complex)的过程。研究蛋白质相互作用可以更好地揭示蛋白质的功能，解码生命活动。蛋白质间相互作用的顺利进行，才能保障细胞的正常生命活动。

因为高死亡率和广泛的抗疟药物的抗药性，恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)已成为最危险的疟原虫，并且在世界上疟疾最严重的大陆非洲地区占主导地位。恶性疟原虫感染导致重症疟疾发病甚至死亡的主要原因是疟原虫指数型生长使感染的红细胞增多导致严重贫血，成熟恶性疟原虫感染的红细胞与微血管内皮细胞的粘附导致微静脉血管系统堵塞，以及感染红细胞和未感染红细胞形成玫瑰花环而致血流阻塞。在其致病机制中，变异表面抗原家族的RIFIN蛋白(P.falciparum-encoded repetitiveinterspersed families of polypeptides)起了重要作用，它们能介导微静脉血管系统中感染红细胞的粘附和玫瑰花环形成，从而阻断血流，堵塞血管导致重症疟疾。RIFIN蛋白在感染红细胞的表面表达，是重要的免疫靶点之一，但由于重复散布的基因家族rif(repetitive interspersed family)的多基因性和基因多态性而使RIFIN蛋白能够逃避免疫系统的攻击。同时，RIFIN蛋白与免疫细胞表面抑制性受体白细胞免疫球蛋白样受体B1(Leukocyte immunoglobulin-like receptor B1，LILRB1)、白细胞相关免疫球蛋白样受体1(Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1，LAIR1)等的结合能下调免疫反应而达到免疫逃避的目的。

近年来，随着耐药恶性疟原虫的不断出现，研发探索新的治疗方案成为实现疟疾控制与消除计划的关键。参与恶性疟原虫免疫逃避机制的变异表面抗原家族的RIFIN蛋白也可能成为重要的生物治疗和疟疾疫苗蛋白候选。目前，还没有关于恶性疟原虫RIFIN蛋白与免疫抑制性受体LILRB1结合的关键区域的报道，这阻碍了探究恶性疟原虫利用变异表面抗原家族RIFIN蛋白进行免疫逃避的分子机制。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN，能够特异性与免疫抑制性受体LILRB1结合，为了研究恶性疟原虫免疫逃逸以及生物治疗提供基础。

本发明提供了一种恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN，所述8-RIFIN的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明提供了所述恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN在制备检测恶性疟原虫的试剂盒中的应用。

优选的，所述恶性疟原虫的检测样本为人或动物的全血或血清。

本发明提供了一种基于免疫检测技术恶性疟原虫检测试剂盒，包括所述恶性疟原虫RIFIN多肽8-RIFIN。

优选的，所述免疫检测技术包括以下一种或几种方法：酶联免疫吸附方法、免疫印迹方法、免疫酶染色方法、间接荧光抗体检测方法和免疫扩散方法。