[发明专利]一种负载活性自体再生因子的微针及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种负载活性自体再生因子的微针及其制备方法和应用。具体地，两次离心血液，保留下层10％体积产物，37℃下放置1h，再0℃继续激活24h，释放ARF；再每1h降温10℃，梯度降温至‑80℃进行预冷，冷冻干燥得到ARF冻干制剂，其ARF浓度高，活性佳，无细胞碎片，更纯净。用水复溶此冻干制剂，混合透明质酸，填充微针模具，真空干燥后得到负载ARF的微针，该微针形貌完整和优异，没有空针和破针，储存2周后仍能保持ARF浓度，刺皮性能佳、溶解性能好、药物递送性能精准、材料降解性能优异，促进毛发生长相关蛋白表达，维持毛乳头细胞的细胞活性，减缓细胞凋亡，生物相容性好，且优于皮下注射PRP。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地，涉及一种负载活性自体再生因子的微针及其制备方法和应用。

背景技术

头发是一个人的形象特征之一，头发的“价值”从古到今就一直存在。由于疾病、创伤、年龄、遗传、药物、压力和应激等各种原因，脱发已经成为一种常见病。雄激素性脱发(AGA)是最常见的脱发类型，通常发生在青春期之后，男性和女性身上都可出现。从宏观上来说，AGA的发病机制是遗传、雄激素代谢及雄激素受体的相互作用、毛囊(hair follicle，HF)及毛乳头细胞(dermal papilla cells，DPC)的自分泌和旁分泌功能等。AGA的病理表现是在皮肤富含毛发生长干细胞区域发现缩小的毛囊，毛囊周围有淋巴细胞和肥大细胞浸润。这种病理表现其实是跟脱发区域生长期缩短、静止毛囊增多和休止期延长有关。毛发生长周期包括三个不同的阶段，即生长期、退化期和休止期。毛囊是皮肤的附属物，包含上皮细胞和间质细胞。毛乳头(DP)位于毛囊底部，一般被认为是毛囊形态改变和毛发周期转换的基础。毛囊形态改变发生在毛发周期变化的过程中，而毛发再生就是在生长期激活的。

虽然AGA的治疗方式很多，但目前针对AGA的治疗效果还不确切，且会存在一些副作用和其他问题。如外用米诺地尔会引起多毛症、皮肤刺激或者过敏性皮炎、心血管疾病方面的意外，口服非那雄胺会引起女性的妇科、乳腺方面的疾病，性功能异常，抑郁症等。这两种药物都需要较长用药时间且需要患者有良好的医从性。螺内酯、环丙孕酮等仅局限女性患者使用。毛囊移植术则需要患者有一定的经济基础和承担手术过程、术后并发症的风险。还有其他一些新型药物缺乏大量的循证医学证据。

雄激素是通过与真皮毛乳头细胞上的受体相互作用来刺激身体某些部位的毛发生长，并通过促进毛发缩小和缩短生长期来抑制头皮毛发的生长。而真皮毛乳头细胞参与调节多种旁分泌生长因子的产生，包括胰岛素样生长因子(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)，均可刺激头发生长。富集血小板血浆(PRP)均含有丰富的各种生长因子，目前也是临床上用来治疗AGA的手段之一。但全球对治疗AGA使用的PRP的制备方法没达成统一标准，因此现阶段使用PRP仅作为AGA治疗的辅助手段。此外，PRP的制备设备价格昂贵，且制剂保质期短，不利于运输和保存。如果患者需要反复治疗就更需要多次抽血操作，增加了患者治疗过程不必要的痛苦，且降低患者的医从性。

活性自体再生因子(autologous regeneration factors，ARF)富集技术是一种基于提取自身血小板、脂肪组织或其他自体组织的固有细胞因子复合物而开发的完整工艺技术，为实现多种生长因子之间相互协同作用而产生的。ARF的优势是自体来源，无疾病传播、免疫排斥反应；其次，ARF中含有多种高浓度的生长因子，各种生长因子的比例与体内正常比例相符，使各生长因子发挥最佳的协同作用。但ARF冻干过程中，因无法引入外源性低温保存剂，存在水结晶的情况，会破坏ARF蛋白质，无法保持ARF高浓度和高活性。