[发明专利]一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒

说明书

本发明公开了一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒；采用一种更加快速的免漂洗的病毒核酸提取，提取流程缩减为裂解、洗脱，可以在极短的时间内提取核酸，避免漂洗环节的诸多问题，同时可以适配自动化提取仪，更加适应自动化、高通量操作，在极短的时间内大范围样本核酸提取。

技术领域

本发明涉及核酸提取技术领域，具体为一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒。

背景技术

病毒的核酸一般为DNA或RNA，现阶段核酸提取的方法有，CTAB法，酶解法、离心柱法等一些传统的提取方法，传统方法使用了苯酚、氯仿等试剂，毒性较大，核酸的回收率较低，损失量较大，实验操作重复性差；酶解法，成本高，作用环境较为严苛；而离心柱法DNA提取的缺点是需要较多的样本，耗材多，需要反复离心，不便于高通量、自动化操作。

磁珠法是纳米科技与生物技术的完美结合，其原理是在磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团，通过不同的裂解液结合液洗涤液在特定的条件下能够与目的物质进行特异性结合，同时利用磁珠自身的磁性，在外磁场的作用下可以方便地实现定向移动与富集，从而达到核酸与杂质分离的目的，进而实现对目标物质的分离纯化，获得纯化核酸。磁珠法具有其他DNA提取方法无法比拟的优势，操作简单，安全无毒，且用时短，提取流程只有裂解、结合、洗涤、洗脱四步，磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大，灵敏度高，能够实现自动化、高通量操作，可适配核酸自动提取仪，在大规模疫情爆发时能够进行快速筛查原因，整个短时间内即可完成。

常规磁珠法核酸提取过程中最常用的漂洗液多为不同浓度乙醇，操作过程中容易出现乙醇残留，需要增加晾干环节，用时较长且不易把控，含乙醇的试剂盒存在运输问题，一般需要客户自行添加，使操作步骤变得繁琐，乙醇易挥发，试剂开瓶稳定性把控较难。

因此，发明一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒，以解决上述背景技术中提出的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒，由以下组分组成：

裂解液、蛋白酶、洗脱液和吸附珠。

进一步的，所述裂解液为胍盐、Tris-HCl、氯化镁、EDTA.2Na、钠盐和SDS的混合溶液。

进一步的，所述裂解液中，0.5～3M胍盐，10～50mM Tris-HCl，1～10mM氯化镁，1～10mM EDTA.2Na，0.1～0.5mM钠盐，0.1～1％SDS。

进一步的，所述胍盐为异硫氰酸胍和盐酸胍其中一种或两种组合。

进一步的，所述Tris-HCl的pH值为7.5～8.0。

进一步的，所述钠盐为氯化钠和醋酸钠其中一种或两种组合。

进一步的，所述蛋白酶为蛋白酶K，蛋白酶浓度为20～50mg/mL。

进一步的，所述洗脱液为无酶水；吸附珠为硅羟基磁珠。

一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒的核酸提取方法，按以下步骤操作：

S1：将病毒样本加入离心管A中，加入裂解液、异丙醇和蛋白酶，混合均匀，加入磁珠，恒温振荡；

S2：将恒温振荡后的离心管A放置在磁力架上，弃上清液；

S3：将磁珠取出放置在磁力架上，晾干；

S4：将晾干后磁珠和洗脱液加入离心管B中，恒温孵育；