[发明专利]一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒在审
申请号: | 202210669243.9 | 申请日: | 2022-06-14 |
公开(公告)号: | CN115074354A | 公开(公告)日: | 2022-09-20 |
发明(设计)人: | 李绣坤;王佩佩;王建国 | 申请(专利权)人: | 江苏幸福基因技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京华际知识产权代理有限公司 11676 | 代理人: | 施欢权 |
地址: | 221000 江苏省徐州市高新技术产*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 多样 漂洗 病毒 核酸 提取 试剂盒 | ||
1.一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:由以下组分组成:
裂解液、蛋白酶、洗脱液和吸附珠;其中裂解液为胍盐、Tris-HCl、氯化镁、EDTA.2Na、钠盐和SDS的混合溶液。
2.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:裂解液中,0.5~3M胍盐,10~50mM Tris-HCl,1~10mM氯化镁,1~10mM EDTA.2Na,0.1~0.5mM钠盐,0.1~1%SDS。
3.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:胍盐为异硫氰酸胍和盐酸胍其中一种或两种组合。
4.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:Tris-HCl的pH值为7.5~8.0。
5.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:钠盐为氯化钠和醋酸钠其中一种或两种组合。
6.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:蛋白酶为蛋白酶K,蛋白酶浓度为20~50mg/mL。
7.根据权利要求1所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒,其特征在于:洗脱液为无酶水;吸附珠为硅羟基磁珠。
8.一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒的核酸提取方法,其特征在于:按以下步骤操作:
S1:将病毒样本加入离心管A中,加入裂解液、异丙醇和蛋白酶,混合均匀,加入磁珠,恒温振荡;
S2:将恒温振荡后的离心管A放置在磁力架上,弃上清液;
S3:将磁珠取出放置在磁力架上,晾干;
S4:将晾干后磁珠和洗脱液加入离心管B中,恒温孵育;
S5:将恒温孵育后的离心管B放置在磁力架上,吸取上清液至离心管C中,即为核酸溶液。
9.根据权利要求8所述的一种适用于多样本的免漂洗病毒核酸提取试剂盒的核酸提取方法,其特征在于:步骤S1中,混合均匀时间为5sec,恒温振荡温度为56℃,恒温振荡速率为1200rpm,恒温振荡时间为4min;步骤S4中,洗脱液加入量为100μL,恒温孵育温度为56℃,恒温孵育时间为5min。
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