[发明专利]特异性识别SARS-CoV-2 S蛋白NTD区域的单克隆抗体及应用

说明书

本发明属于单克隆抗体领域，具体涉及一种特异性识别SARS‑CoV‑2S蛋白NTD区域的单克隆抗体及应用。该单克隆抗体包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1‑3所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，以及氨基酸序列如SEQ ID NO：4‑6所示的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。本发明提供的上述单克隆抗体，可特异性识别并结合S蛋白的supgt;286/supgt;TDAVDCALDPLSsupgt;297/supgt;区域，效价高达1:1024000，并具有良好的特异性，在检测SARS‑CoV‑2上具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于单克隆抗体领域，具体涉及一种特异性识别SARS-CoV-2 S蛋白NTD区域的单克隆抗体及应用。

背景技术

新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)是具有包膜的正链RNA病毒。SARS-CoV-2的基因组长为29.9kb，其基因组为单股、正链RNA，基因组的5’端带有帽子结构，其后包含6～10个开放阅读框(Open readingframes，ORFs)。占据基因组2/3的第一个阅读框编码复制酶，基因组的后1/3主要编码结构蛋白，一般包括纤突蛋白(Spike，S)、小包膜蛋白(Envelope，E)、囊膜蛋白(Membrance，M)、核蛋白(Nucleocapsid，N)。其中S蛋白是一种跨膜蛋白，且高度糖基化，由1273个氨基酸组成，N端有21-35个糖基化位点。S蛋白以三聚体的形式在病毒表面形成特殊的花冠结构，冠状病毒因此而得名。

S蛋白在宿主细胞蛋白酶的作用下被裂解为S1和S2两部分，S1主要功能是与宿主细胞表面受体结合，S2亚基介导病毒-细胞以及细胞-细胞膜融合。目前研究倾向于把冠状病毒S蛋白S1亚单位划分成2个结构域——N末端结构域(S1-NTD)和C末端结构域(S1-CTD)，2个功能域都能作为受体结合域(Receptor binding domain，RBD)。一般认为，S1-NTD结合糖类受体，S1-CTD结合蛋白类受体。

表位是蛋白质抗原性的基础，是抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，也是抗原分子诱导特异性免疫反应的基本结构和功能单位。因此，准确细致地绘制抗原表位对疾病诊断、对蛋白质分子进行针对性修饰以降低蛋白质药物的免疫原性、设计无副作用的人工疫苗以及免疫干预治疗都具有积极意义。筛选出S1-NTD结构域免疫显性表位区域，对该病的诊断和多肽疫苗的研制具有重要价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种特异性识别SARS-CoV-2 S蛋白NTD区域的单克隆抗体，该单克隆抗体效价可达1:1024000，并具有良好的特异性。

本发明的第二个目的是提供编码上述单克隆抗体的核酸分子。

本发明的第三个目的是提供上述单克隆抗体的应用。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种特异性识别SARS-CoV-2 S蛋白NTD区域的单克隆抗体，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1-3所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，以及氨基酸序列如SEQ ID NO：4-6所示的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。

本发明提供的上述单克隆抗体，可特异性识别并结合S蛋白的²⁸⁶TDAVDCALDPLS²⁹⁷区域，效价高达1:1024000，并具有良好的特异性，在检测SARS-CoV-2上具有良好的应用前景。

优选地，所述单克隆抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。进一步优选地，所述单克隆抗体的重链为IgG1型，轻链为Kappa型。

一种核酸分子，其编码上述单克隆抗体。