[发明专利]一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法

说明书

一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法，高效液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；流动相：乙腈、甲醇或乙醇任意一种或多种的水溶液；样品预处理剂：甲磺酸；泵速：0.7‑1.3L/min；柱温：20‑35℃；检测器波长：225‑235nm；进样体积：1‑10μl，洗脱方式：等度洗脱。本发明提供了一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法，采用液相色谱反相柱测量烯效唑还原反应产物中的E‑烯酮产物含量，可以有效分离产品中的异构体，得到准确的测试结果。

技术领域

本发明涉及一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法，属于烯效唑生产技术领域。

背景技术

烯效唑（C₁₅H₁₈ClN₃O）

中文学名：(E)-(RS)-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-戊-1-烯-3-醇，为淡黄色或白色固体、均匀疏松粉末，纯品为白色结晶固体，熔点150～160℃。沸点476℃，相对密度（水=1）1.18，闪点240.8℃，能溶于丙酮、甲醇、乙酸乙酯、氯仿和二甲基甲酰胺等多种有机溶剂，难溶于水（8.41mg/L)。

烯效唑属广谱性、高效植物生长调节剂，兼有杀菌和除草作用，是赤霉素合成抑制剂。具有控制营养生长，抑制细胞伸长、缩短节间、矮化植株，促进侧芽生长和花芽形成，增进抗逆性的作用。其活性较多效唑高6-10倍，但其在土壤中的残留量仅为多效唑的1/10，因此对后茬作物影响小，可通过种子、根、芽、叶吸收，并在器官间相互运转，但叶吸收向外运转较少。向顶性明显。适用于水稻、小麦，增加分蘖，控制株高，提高抗倒伏能力。用于果树控制营养生长的树形。用于观赏植物控制株形，促进花芽分化和多开花等。

目前烯效唑的主要的合成路线为三氮唑与一氯频呐酮等合成唑酮，然后唑酮与对氯苯甲醛在催化剂作用下合成烯酮，烯酮经过催化剂转位合成E烯酮，然后经还原加成得到中间体，经过水解得到产品烯效唑。

目前烯效唑生产中E-烯酮在线分析的主要方法是：

烯效唑前体E烯酮在还原加成时，通常采用硼氢化钾低温还原为E烯酮硼盐中间体，分析时，需要取反应生成的E烯酮硼盐甲醇液，采用极性气相色谱柱，进气相色谱分析E烯酮含量，该方法为目前普遍常用的方法。这种方法的优势在于各种物质和杂质可以在气相色谱中出峰，更利于观察反应体系中存在的杂质情况，可以对反应物纯度进行定性判断。但气相色谱法的劣势在于：1）样品预制后极性过强，必须选用成本极高的极性柱，并且极性柱的寿命用于E烯酮硼盐分析寿命很短，造成分析成本过高；2）气相色谱分析时杂质出峰固然可以分析反应体系中的杂质情况，但杂峰过多会也会干扰对产品主峰和前体峰的定性判断，并且峰型走势不好，常有拖尾或峰分离不全等问题发生，导致分析结果偏差。

鉴于气相色谱分析有以上缺点，业内尝试采用液相色谱分析烯效唑的还原反应产物E-烯酮，但烯效唑的还原反应产物中存在如下两种异构体：Z-烯酮及E-烯酮，其中E-烯酮为需要测出的有效成份，这两种异构体除手性相反外其余物化特性均基本相同，特别是分子极性也其本相同，在液相色谱测量中的保留时间基本一致，导致液相色谱中出峰重叠，无法准确定量分析其中的E-烯酮含量。因此，业内普遍认为，烯效唑的还原反应产物是无法利用液相色谱进行定量分析的。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法，采用液相色谱反相柱测量烯效唑还原反应产物中的E-烯酮产物含量，可以有效分离产品中的异构体，得到准确的测试结果。

为实现以上目的，本发明采用的技术方案为：一种烯效唑还原反应产物高效液相反相柱定量检测方法，高效液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；流动相：乙腈、甲醇或乙醇任意一种或多种的水溶液；样品预处理剂：甲磺酸；泵速：0.7-1.3L/min；柱温：20-35℃；检测器波长：225-235nm；进样体积：1-10μl，洗脱方式：等度洗脱；

进一步的，所述流动相为乙腈的30%水溶液；