[发明专利]一种光子晶体生物芯片及其蛋白检测方法有效

专利信息
申请号: 202210637489.8 申请日: 2022-06-08
公开(公告)号: CN114705869B 公开(公告)日: 2022-09-13
发明(设计)人: 杜杰;王媛;薛冰洁;王雪 申请(专利权)人: 北京市心肺血管疾病研究所
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/546
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 王灏增
地址: 100029*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 光子 晶体 生物芯片 及其 蛋白 检测 方法
【权利要求书】:

1.光子晶体生物芯片,其特征在于,所述光子晶体生物芯片包括反应基底层,所述反应基底层上设有至少一个稳定捕获区和至少一个不稳定检测区;所述稳定捕获区包含打印在反应基底层上的光子晶体阵列及至少一种捕获抗体,所述捕获抗体与光晶阵列共价结合,固定在光晶阵列表面;所述不稳定检测区包含至少一种检测抗体,所述检测抗体被荧光基团标记;所述检测抗体通过喷墨打印非共价固定在芯片表面,排列在光晶阵列外围;

所述光子晶体为聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸-苯乙烯)乳胶球;所述聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸--苯乙烯)乳胶球的粒径为300nm;所述捕获抗体为检测可溶性ST2蛋白的捕获抗体NbA,所述捕获抗体NbA为氨基酸序列为序列1所示的单域抗体1A9;所述检测抗体为检测可溶性ST2蛋白的检测抗体Cy5-NbB,所述检测抗体Cy5-NbB为连接有Cy5基团的单域抗体2B10,所述单域抗体2B10的氨基酸序列如序列2所示。

2.根据权利要求1所述的光子晶体生物芯片,其特征在于,所述反应基底层为高分子片或高分子膜。

3.根据权利要求2所述的光子晶体生物芯片,其特征在于,所述反应基底层由聚酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸、聚丙烯或聚氯乙烯制成。

4.一种检测待测蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括将待测样本滴在权利要求1-3中任一所述的光子晶体生物芯片上,进行荧光检测,根据荧光检测结果确定所述待测样本是否含有待测蛋白,所述待测蛋白为可溶性ST2蛋白。

5.一种制备权利要求1-3中任一所述的光子晶体生物芯片的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

1)在反应基底层的表面均匀涂覆一层胶黏剂,得到基材;

2)在所述基材上,以含有光晶小球的液体为墨水打印光晶阵列,得到带有光晶阵列的基材;

3)将所述带有光晶阵列的基材干燥后,加热固化;

4)固化完成后,活化光晶阵列,加入捕获抗体使其与光晶阵列结合,形成稳定捕获区;

5)使用BSA进行封闭;

6)在光晶阵列的外围固定检测抗体,形成不稳定检测区。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述含有光晶小球的液体由919体积份的聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸-苯乙烯)乳胶球、80体积份的乙二醇和1体积份的表面活性剂配制而成;所述聚(甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸-苯乙烯)乳胶球的粒径为300nm;所述加热固化条件为110℃,10min。

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