[发明专利]金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法

说明书

本发明公开了金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法，包括以下步骤：a.选取新西兰大白兔；b.选取钛合金螺钉、并对其预处理；c.在新西兰大白兔左膝关节下方内侧2cm处做长1cm纵型切口,逐层切开至骨皮质；d.选用直径2mm的钻头，将骨皮质开孔，将金黄色葡萄球菌污染的钛合金螺钉植入骨隧道，逐层缝合切口，无菌包扎；e.获取CT影像学资料，并观察钛合金螺钉周围骨质破坏、软组织肿胀情况等情况；f.取出螺钉行扫描电镜检测、组织病理性染色。本申请简单有效便于操作、建模时间短，可作为一种完善而且切实可行的骨感染生物模型，对临床上骨感染发病机制的探索、骨感染治疗途径、研制新药的效果和安全性的评价，可提供实验基础。

技术领域

本发明涉及骨感染技术领域，尤其涉及金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法。

背景技术

内植物相关感染是骨科的灾难性并发症之一，具有难治疗，易复发，疗效差，治疗周期长等特点，严重者可导致截肢或死亡。据报道，骨感染发病率在3％-5％，但复发率高达40％，引起内植物相关感染的主要致病菌为金黄色葡萄球菌。导致骨感染难治疗的原因之一，是金黄色葡萄球菌具有形成细菌生物膜的潜能。因为抗生素难以穿透细菌生物膜而无法杀菌，因此细菌生物膜是帮助细菌免疫逃逸的保护性装置。

近年来，广大科研工作者聚焦于金色黄色葡萄球菌致骨感染的相关研究。但既往多采用小鼠建造骨感染动物模型。采用新西兰大白兔建造骨感染模型的依据较少、方法欠稳定，而且与感染性疾病的临床特征契合度较低，因此使用范围受到局限。

基于此，本申请提出金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决上述问题，而提出的金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

金黄色葡萄球菌性新西兰大白兔骨感染动物模型构建方法，包括以下步骤：

a.选取新西兰雌性大白兔；

b.选取钛合金螺钉、并对其预处理；

c.在新西兰大白兔左膝关节下方内侧2cm处做长1cm纵型切口,逐层切开至骨皮质；

d.选用直径2mm的钻头，将骨皮质开孔，将金黄色葡萄球菌污染的钛合金螺钉植入骨隧道，逐层缝合切口，无菌包扎；

e.获取CT影像学资料，并观察钛合金螺钉周围骨质破坏、软组织肿胀情况等情况；

f.取出螺钉行扫描电镜检测，可见螺钉表面有大量细菌附着及生物膜形成；

g.将骨组织行组织病理学染色(HE染色及革兰氏阴性染色)，可见钉道周围大量炎细胞浸润及呈蓝色的革兰氏阳性球菌，据此，可确认此模型构建成功。

优选地，所述a步骤中的新西兰大白兔为8-12周、体重在2-2.5千克的新西兰雌性大白兔。

优选地，所述b步骤中的钛合金螺钉规格为直径2.7mm，长10mm。

优选地，所述b步骤中的预处理方式为：将钛合金螺钉浸泡于1×10⁵CFU的金黄色葡萄球菌(ATCC29213)的菌液中，浸泡24小时后取出，自然风干30分钟。

优选地，进行所述c步骤之前需要对新西兰大白兔备皮无菌消毒处理。

优选地，所述e步骤中获取CT影像学资料为植入钛合金螺钉术后七周图像。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：