[发明专利]一株能够裂解阪崎肠杆菌的广谱噬菌体LPCS28及应用

说明书

本发明属于食品安全领域，公开了一株能够裂解阪崎肠杆菌的广谱噬菌体LPCS28及应用，所述噬菌体的保藏编号为：CCTCC NO：M2022036。该噬菌体具有很广的宿主谱，不仅能够有效裂解阪崎克罗诺杆菌、丙二酸盐克罗诺杆菌、苏黎世克罗诺杆菌、莫金斯克罗诺杆菌、都伯林克罗诺杆菌等5个不同种的克罗诺杆菌，而且还能裂解阴沟肠杆菌。克服了噬菌体具有种型特异性的缺点，其杀菌应用范围更大。

技术领域

本发明涉及食品安全领域，具体涉及一株能够裂解阪崎肠杆菌的广谱噬菌体LPCS28及应用。

背景技术

阪崎肠杆菌(C.sakazakii)是一种食源性致病菌，它可以从家庭环境、饮用水以及临床、食品和饮料中分离出来。阪崎肠杆菌能够感染所有人群，但通常在免疫功能低下的婴儿和老年人中发病率更高。婴儿感染的临床症状包括脑膜炎、菌血症和坏死性小肠结肠炎等，死亡率高达40％-80％。成人感染表现出结膜炎、胆汁性败血症、尿毒症和肺炎等症状。

噬菌体是一种可以感染细菌的病毒，它广泛存在于环境中，裂性噬菌体感染细菌后，可在宿主菌内快速增殖，并使之裂解。因此，在食品中，噬菌体能够作为抗菌剂来控制细菌污染，具有潜在的应用价值。自2006年第一个用于防控肉类和家禽中单核细胞增生李斯特菌污染的噬菌体产品(LiestShied^TM)获批以来，一些噬菌体产品陆续获得FDA的批准。

2017年，Lorraine Endersen等人发表了三种阪崎肠杆菌噬菌体的组合物，其阪崎肠杆菌(现在又称为阪崎克罗诺杆菌)噬菌体组合物对所测试的克罗诺杆菌菌株裂解率为73％。2021年，Luo等人发表了一株阪崎肠杆菌噬菌体vB_CtuP_A24，其温度耐受性为25℃-60℃。CN201010171541.2公开了5株具有阪崎肠杆菌杀伤作用的阪崎肠杆菌噬菌体SK1、SK2、SK3、SK4和SK5组合物及其应用，该噬菌体组合物中的任何一种噬菌体均不能完全裂解所收集的实验菌株，裂解范围最广的噬菌体SK5裂解率为89％。CN201711099522.1公开了一种阪崎肠杆菌噬菌体EspYZU05及其用途，该噬菌体在9小时后实验组仅比对照组减少3log₁₀CFU/mL。

针对上述噬菌体的问题，本发明中的噬菌体LPCS28对所测试的克罗诺杆菌菌株的裂解率为95％，本发明中的噬菌体LPCS28在25℃-60℃能够保持较高活性，在70℃效价仍能达到10⁵PFU/mL。本发明中的噬菌体LPCS28为广谱型噬菌体，其对实验所收集的阪崎克罗诺杆菌(C.sakazakii)裂解率为100％，并且能够裂解丙二酸盐克罗诺杆菌(C.malonaticus)、苏黎世克罗诺杆菌(C.turicensis)、莫金斯克罗诺杆菌(C.muytjensii)、都伯林克罗诺杆菌(C.dublinensis)等其他4个不同种克罗诺杆菌，该噬菌体还可裂解阴沟肠杆菌(E.cloacae)。本发明中噬菌体LPCS28能够在9小时后使实验组细菌总量比对照组减少5.7log₁₀CFU/mL。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种阪崎肠杆菌噬菌体，所述噬菌体的保藏编号为：CCTCC NO：M2022036。

本发明的另一个目的在于提供了阪崎肠杆菌噬菌体LPCS28在制备抑菌剂中的应用，特别是食品抑菌剂中的应用。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

本发明从湖北省武汉市水样中筛选到一株对多种克罗诺杆菌和阴沟肠杆菌都有裂解活性的广谱型噬菌体LPCS28，该噬菌体已于2022年01月07日送至中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)保藏，保藏地址：中国武汉武汉大学；保藏编号：CCTCC NO：M2022036，分类命名：阪崎肠杆菌噬菌体(Enterobacter sakazakii phage)LPCS28。

本发明中的阪崎肠杆菌(又称为阪崎克罗诺杆菌)噬菌体LPCS28具有以下生物学特征：