[发明专利]一种pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法，具体方法为：(1)制备ZnO‑Ag纳米颗粒，(2)制备含有巯基的叔胺化合物，(3)制备ZAN@CS纳米材料。本发明还公开了该制备方法制备的ZAN@CS纳米材料在靶向清除幽门螺杆菌的应用，该纳米材料pH从酸性到中性都会有电荷转变的响应性，同时首次将ZnO‑Ag用于胃部幽门螺杆菌的感染；本发明的ZAN@CS纳米材料解决了现阶段抗生素治疗幽门螺杆菌的难点，即抗生素难以穿透粘液屏障，幽门螺杆菌生物膜的形成降低了抗生素的疗效，幽门螺杆菌对抗生素会产生耐药性，应用抗生素会破坏肠道正常菌群，引起肠道疾病等问题。

技术领域

本发明属于新型纳米材料制备，具体涉及一种pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法及其应用。

背景技术

幽门螺杆菌是人类感染的最常见原因之一，特别是在发展中国家，其患病率可达到人口的90％。幽门螺杆菌每年都与高发病率和重大死亡率有关，被认为具有传染性，并与胃腺癌的发生有关。幽门螺杆菌是一种螺旋状的革兰氏阴性细菌，定植于人类胃肠道，主要是胃粘膜下层。它释放的尿素酶可以将尿素转化为氨，以增加菌体周围的pH值，抵抗胃酸的破坏，这也是长期定植于胃粘膜的一个重要原因。主要的毒力因子包括尿素酶的产生、运动能力、基因相关的细胞毒素(CagA)、空泡细胞毒素(VacA)和形成生物膜的能力。幽门螺杆菌产生的毒力因子可以直接作用于胃粘膜，刺激粘膜细胞、中性粒细胞和巨噬细胞分泌大量的炎症趋化因子，从而引起严重的炎症反应。目前针对幽门螺杆菌感染的一线治疗方案包括三联疗法，即两种抗生素(阿莫西林加克拉霉素或甲硝唑)和质子泵抑制剂，然而由于胃部特殊环境，抗生素的利用率较低，抗生素难以穿透粘液屏障，治疗幽门螺杆菌后还会影响正常肠道菌群，从而产生肠道疾病。另外，针对抗生素耐药的幽门螺杆菌也越来越多，这些都大大降低了抗生素的疗效，而且三联疗法中患者需大量用药，导致患者依从性变差。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种制备方法简单，pH从酸性到中性都会有电荷转变响应的pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法。

本发明的另一目的是提供一种pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法以及所制备的ZAN@CS纳米材料在靶向清除幽门螺杆菌中的应用。

技术方案：为了解决现有技术中的问题，本发明提供了一种pH响应型ZAN@CS纳米材料的制备方法，具体制备方法如下：

(1)制备ZnO-Ag纳米颗粒：将NaOH溶液加入含有Zn(CH₃COO)₂ 2H₂O溶液中，加热反应后得到的ZnO纳米颗粒；将ZnO和DA加入到Tris-HCL中，离心反应后得到ZnO@PDA；将ZnO@PDA和AgNO₃分别溶解于有机溶剂中，混合后室温反应，离心后收集沉淀即得ZnO-Ag；

(2)制备含有巯基的叔胺化合物：将DCC、NHS和含有巯基的酸混合，再加入含有氨基的叔胺化合物反应，得到沉淀后旋蒸、洗涤，得到含有巯基的叔胺化合物；

(3)制备ZAN@CS纳米材料：将步骤(1)制备的ZnO-Ag和步骤(2)制备的含有巯基的叔胺化合物在有机溶剂中混合，得到沉淀后，将沉淀分散在水中，加入壳聚糖混合、离心，所得沉淀为ZAN@CS纳米材料。

进一步地，步骤(1)所述NaOH水溶液缓慢加入含有Zn(CH₃COO)₂ 2H₂O的甲醇溶液中，速度为每分钟加0.5～1mL，在80～90℃加热反应，反应5-8h后得到。

作为优选，步骤(1)所述NaOH水溶液缓慢加入含有Zn(CH₃COO)₂ 2H₂O的甲醇溶液中，速度为每分钟加0.5mL，在85℃加热反应为反应6h后得到ZnO纳米颗粒。