[发明专利]一种重复利用藻细胞生产GG产品的方法

权利要求书

1.一种恢复藻细胞中甘油葡糖苷产量的方法，其特征在于，所述藻细胞是高渗溶液胁迫培养并通过低渗溶液萃取后的废弃藻细胞，所述方法包括以下步骤：

(1)获得高渗溶液胁迫培养并通过低渗溶液萃取后的废弃藻细胞；

(2)恢复上述废弃藻细胞在高渗溶液下的生长状态：将所述废弃藻细胞接种到培养基中进行培养，所述培养基中含有细胞渗透压的调节剂，所述调节剂在培养基中的浓度为600mmol/L≥C1≥100mmol/L；

(3)实现胞内高含量甘油葡糖苷的富集：将步骤(2)中培养的藻细胞接种到培养基中进行培养，所述培养基中调节剂的浓度为1500mmol/L≥C2≥600mmol/L。

2.如权利要求1所述恢复藻细胞中甘油葡糖苷产量的方法，其特征在于，所述藻细胞为包括但不限于自养型微藻或异养型微藻中的一种；具体的，所述藻细胞为蓝藻。

3.如权利要求1所述恢复藻细胞中甘油葡糖苷产量的方法，其特征在于，所述细胞渗透压的调节剂为盐，进一步的，为无机盐和/或有机盐无机盐和/或有机盐的一种或多种组合。

4.如权利要求3所述恢复藻细胞中甘油葡糖苷产量的方法，其特征在于，所述无机盐为氯化钠、硫酸钠、氯化钾或其他无机盐类中的一种或多种；所述有机盐为甲酸钠、乙酸铵或其他有机盐类中的一种或多种。

5.一种重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，包括按照权利要求1-4任一项所述恢复藻细胞中甘油葡糖苷产量的方法对藻细胞中甘油葡糖苷进行富集，还包括对恢复后藻细胞中甘油葡糖苷的提取。

6.权利要求5所述重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，所述生产方法的步骤如下：

(1)提取：将藻细胞培养至一定生物量，补加渗透压调节剂使藻细胞处于高渗培养环境中，继续培养蓝藻细胞使其富集甘油葡糖苷，收集藻细胞采用低渗萃取剂混合萃取，对萃取液进行分离、提纯，获得高纯度的甘油葡糖苷产品；

(2)收集步骤(1)低渗萃取后的藻细胞置于低渗培养环境中培养至平台期，再转入高渗培养环境中使其合成并富集甘油葡糖苷，并重复(1)提取步骤。

7.权利要求6所述重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，所述生产方法中，所述培养过程采用的培养基为Zarrouk培养基。

8.权利要求6所述重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述藻细胞培养的条件如下：培养温度为25～30℃，光照强度为250～350μmolphotons/m²/s，培养过程中通入二氧化碳浓度为3～7％的空气。

9.权利要求6所述重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述高渗培养环境中，所述调节剂的浓度为600mmol/L及以上，所述高渗培养的时间为3天及以上。

10.权利要求6所述重复利用藻细胞生产甘油葡糖苷的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述低渗培养环境中，调节剂的浓度为600mmol/L≥C1≥100mmol/L；

或，步骤(2)中，所述低渗培养的时间为2天及以上。