[发明专利]动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂及其制备方法与应用。涉及细胞工程技术领域。该动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂，以单核巨噬细胞为基础，以“膜修饰材料”CD47p、纳米辅助中间载体GQDs以及基因药物miRNA223交联而成的体系CD47p‑GQDs‑miRNA223为工具，利用细胞表面纳米工程化技术构建得到的M‑CD47p‑GQDs‑miRNA223。本发明的免疫细胞治疗剂可以将药物精准靶向递送至AS病灶处，从而解决了AS非创治疗中药物全身非特异性分布取得的治疗效果并不显著的问题。

技术领域

本发明涉及细胞工程技术领域，更具体的说是涉及动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂M-CD47p-GQDs-miRNA223及其制备方法与应用。

背景技术

目前，近年来，随着细胞学、免疫学、分子生物学和组织工程技术的快速发展，细胞治疗疗法作为一种安全而有效的治疗手段，在临床治疗中的作用越来越突出，被誉为“未来医学的第三大支柱”。例如，细胞治疗已成为继传统“手术、化疗、放疗”肿瘤三大治疗方式之后的第四种治疗模式。由于具有选择性高、局部浓度高、可个性化修饰三大优势，细胞治疗产品将占据未来疾病治疗市场的重要份额。

动脉粥样硬化是临床的常见疾病，是缺血性心脑血管病的主要病理基础。大量临床和实验室数据资料证明，粥样不稳定斑块的破裂所引起的继发血栓形成进而导致管腔的急性闭塞是大部分急性血管事件发生的根本原因。因此，降低不稳定性斑块的形成以及稳定易损斑块，是基础医学和临床研究迫切需要解决的问题。

实际上，动脉粥样硬化是一种炎性疾病，炎性反应是动脉粥样斑块破裂的关键因素。单核细胞(约占炎性细胞80％)趋化粘附迁移是动脉粥样硬化炎症反应的初期表现，当斑块内有大量的炎性细胞浸润，直接或间接参与细胞外基质的降解、剪应力增加等使动脉管腔进行性狭窄等触发因素的存在，同时，单核巨噬细胞还可通过吞噬作用或释放纤溶酶原激活物降解细胞外基质，削弱纤维帽，使纤维帽变薄，导致斑块持续性处于脆弱的状态，直至破裂。因此，通过调控炎性反应促进斑块稳定是治疗颈动脉粥样硬化不稳定斑块的策略之一。然而目前临床针对动脉粥样硬化斑块(AS)的治疗根据其发病进程辅以口服他汀类药物进行全身降脂或者手术干预治疗。作为安全性更高的非创治疗，口服药物的剂量采纳和全身非特异性分布取得的治疗效果并不显著。

因此，开发一种具有特异性靶向功能的细胞治疗方式是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂M-CD47p-GQDs-miRNA223及制备方法，解决动脉粥样硬化非创治疗中口服药物的剂量采纳和全身非特异性分布取得的治疗效果并不显著等问题。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种动脉粥样硬化斑块的免疫细胞治疗剂，所述免疫细胞治疗剂以单核细胞为基础，以“膜修饰材料”CD47p、纳米辅助中间载体GQDs以及基因药物miRNA223交联而成的体系CD47p-GQDs-miRNA223为工具，利用细胞表面纳米工程化技术构建得到的M-CD47p-GQDs-miRNA223；所述细胞表面纳米工程化技术是利用CD47p与单核细胞表面信号调节蛋白α(SIRPα)的结合，二者的IgV结构域结合后传递“Don't eat me”信号进而激活单核细胞的吞噬抑制作用，从而避免载药细胞对自体载药基因的自噬，利用AS早期炎性细胞(单核细胞约占炎性细胞的80％)向病灶处募集的特性24h内将基因药物精准靶向递送至AS病灶处；所述免疫细胞治疗剂24h后吞噬抑制作用逐渐失效，miRNA掉落并被病灶处巨噬细胞摄取，从而发挥调控作用。

所述CD47p为具有CD47 IgV结构域的衍生肽；所述GQDs为氨基化的石墨烯量子点。