[发明专利]一种核酸提取纯化系统及利用其提取纯化核酸的方法在审
| 申请号: | 202210561658.4 | 申请日: | 2022-05-23 |
| 公开(公告)号: | CN114921458A | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
| 发明(设计)人: | 赖演媚;赖柔贝 | 申请(专利权)人: | 广州博仁安康医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 王伟 |
| 地址: | 510000 广东省广州市黄埔区瑞和路3*** | 国省代码: | 广东;44 |
| 权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核酸 提取 纯化 系统 利用 方法 | ||
1.一种核酸提取纯化系统,其特征在于,所述核酸提取纯化系统包括:试剂储存袋P1~P4、控制转动阀V1~V2、样品混合槽,装有硅胶膜的核酸分离室,预装干燥试剂的PCR室、加热器和低温加热器。
2.一种利用权利要求1所述核酸提取纯化系统提取纯化核酸的方法。
3.根据权利要求2所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
S1.将待测样本置于萃取溶液中在pH 8、室温下孵育;
S2.将裂解完成的萃取溶液滴入样品混合槽中,所述样品混合槽底部含有微量微硅胶微粒子;
S3.初始状态下,阀门V1处于关闭状态,试剂储存袋P1压缩使结合缓冲液进入样品混合槽,与样本混合;
S4.在样品混合槽中孵育,在高盐与低pH环境下,微量核酸与硅胶膜粒子结合,阀门V1打开,阀门V2转向回收槽,使裂解液借助微型真空泵强制流过硅胶膜,同时核酸与硅胶膜第二次结合,而其他裂解物成分流动通过硅胶膜到达回收槽;
S5.试剂储存袋P2压缩,将去除抑制剂苯酚-氯彷通过硅胶膜,将其他裂解物成分流动通过硅胶膜到达回收槽;
S6.试剂储存袋P3压缩,将75%乙醇清洗溶液通过硅胶膜到达回收槽;
S7.打开加热器,用加热空气干燥膜真空泵去除残留的挥发性污染物,然后阀门V2转向PCR反应槽流道,试剂储存袋P4压缩,排出洗脱缓冲液通过硅胶膜解吸结合的核酸,洗脱的核酸被转移到PCR室。
4.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S1所述萃取溶液包括5M硫氰酸胍、40mM二硫苏糖醇、20mg/mL糖原、1%Triton X-100和25mM柠檬酸钠。
5.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S3所述结合缓冲液pH5.2,包含225mM醋酸钠及5M硫氰酸胍。
6.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S1所述待测样品为鼻咽拭子或病毒培养液。
7.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述洗脱缓冲液包括低摩尔浓度Tris缓冲液或无核酸酶水。
8.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述加热空气的温度为60~70℃。
9.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述加热空气的温度为65℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广州博仁安康医疗科技有限公司,未经广州博仁安康医疗科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210561658.4/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。





