[发明专利]一种核酸提取纯化系统及利用其提取纯化核酸的方法在审

专利信息
申请号: 202210561658.4 申请日: 2022-05-23
公开(公告)号: CN114921458A 公开(公告)日: 2022-08-19
发明(设计)人: 赖演媚;赖柔贝 申请(专利权)人: 广州博仁安康医疗科技有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 王伟
地址: 510000 广东省广州市黄埔区瑞和路3*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 核酸 提取 纯化 系统 利用 方法
【权利要求书】:

1.一种核酸提取纯化系统,其特征在于,所述核酸提取纯化系统包括:试剂储存袋P1~P4、控制转动阀V1~V2、样品混合槽,装有硅胶膜的核酸分离室,预装干燥试剂的PCR室、加热器和低温加热器。

2.一种利用权利要求1所述核酸提取纯化系统提取纯化核酸的方法。

3.根据权利要求2所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

S1.将待测样本置于萃取溶液中在pH 8、室温下孵育;

S2.将裂解完成的萃取溶液滴入样品混合槽中,所述样品混合槽底部含有微量微硅胶微粒子;

S3.初始状态下,阀门V1处于关闭状态,试剂储存袋P1压缩使结合缓冲液进入样品混合槽,与样本混合;

S4.在样品混合槽中孵育,在高盐与低pH环境下,微量核酸与硅胶膜粒子结合,阀门V1打开,阀门V2转向回收槽,使裂解液借助微型真空泵强制流过硅胶膜,同时核酸与硅胶膜第二次结合,而其他裂解物成分流动通过硅胶膜到达回收槽;

S5.试剂储存袋P2压缩,将去除抑制剂苯酚-氯彷通过硅胶膜,将其他裂解物成分流动通过硅胶膜到达回收槽;

S6.试剂储存袋P3压缩,将75%乙醇清洗溶液通过硅胶膜到达回收槽;

S7.打开加热器,用加热空气干燥膜真空泵去除残留的挥发性污染物,然后阀门V2转向PCR反应槽流道,试剂储存袋P4压缩,排出洗脱缓冲液通过硅胶膜解吸结合的核酸,洗脱的核酸被转移到PCR室。

4.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S1所述萃取溶液包括5M硫氰酸胍、40mM二硫苏糖醇、20mg/mL糖原、1%Triton X-100和25mM柠檬酸钠。

5.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S3所述结合缓冲液pH5.2,包含225mM醋酸钠及5M硫氰酸胍。

6.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S1所述待测样品为鼻咽拭子或病毒培养液。

7.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述洗脱缓冲液包括低摩尔浓度Tris缓冲液或无核酸酶水。

8.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述加热空气的温度为60~70℃。

9.根据权利要求3所述的提取纯化核酸的方法,其特征在于,步骤S7所述加热空气的温度为65℃。

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