[发明专利]一种用牛皮生产胶原三肽的方法

说明书

本发明提供了一种用牛皮生产胶原三肽的方法，是由以下步骤制得的：预处理、变性处理、激发处理、胶原三肽液，将胶原三肽液灭酶、离心，收集上清液，K15活性碳柱脱色脱味，喷雾干燥，得胶原三肽。本发明的方法可以彻底酶解胶原蛋白，酶解产物分子量小且集中，胶原三肽得率高，羟脯氨酸含量高，总氮含量高，灰分含量低，成品细腻，水溶性好，有利于规模化生产。

技术领域

本发明属于活性物质提取技术领域，特别涉及一种用牛皮生产胶原三肽的方法。

背景技术

胶原蛋白富含人体需要的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等胶原蛋白特征氨基酸。胶原蛋白是一种高分子功能性蛋白质，它是皮肤的主要组成部分，占皮肤真皮层80％的比重，它在皮肤中构成了一张细密的弹力网，牢固锁住水分，支撑着皮肤。胶原蛋白是由三条肽链拧成的螺旋纤维状蛋白质，也是人体内含量最丰富的蛋白质，广泛分布于结缔组织、皮肤、骨骼、内脏细胞间质及肌腔、韧带、巩膜等部位，大约占人体总蛋白质的30％以上，是人体细胞特别是肌肤细胞外基质中重要组成部分。胶原蛋白是大分子蛋白质，其分子量在300,000Da以上，不能被人体直接吸收。

胶原的最小单元是胶原三肽(Collagentripeptide)简称CTP，其结构可以表示为(Gly-X-Y)，是一种在N端带有甘氨酸的高纯度的胶原三肽。胶原三肽具有多种生物活性，如促进皮肤再生、骨骼生长、抗氧化、抗动脉粥样硬化等。在应用于皮肤表面时，具有良好的细胞黏结性、吸收性和生物相溶性，在化妆品中作为保湿剂和皮肤保护剂，可促进上皮细胞形成，直接补充人体流失的胶原蛋白，延缓皮肤衰老，可用于祛皱、保湿和修复等。微量射线自动照相法研究表明，CTP具有约280Da的平均分子量。而目前市场上的绝大多数胶原肽，主要由30至100个氨基酸构成多聚氨基酸平均分子量达3000-10000Da，其生物利用率有限。

动物皮因来源丰富、价格低廉而成为提取胶原的常用材料。牛皮作为肉食工业牛肉的加工副产物除部分用于制革工业外，其余有待开发和利用。现有的胶原三肽产率低、纯度不高，严重制约了胶原三肽的深度开发和应用。

发明内容

本发明提供了一种可以彻底酶解胶原蛋白，酶解产物分子量小且集中，胶原三肽得率高，水溶性好的用牛皮生产胶原三肽的方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种用牛皮生产胶原三肽的方法，是由以下步骤制得的：

1)预处理：取鲜牛皮，清洗干净，脱毛，切割成不大于4×4mm的小块，加至质量分数为3-7％的氯化钠溶液中，常温浸泡1h，控干水分，再加至0.1mol/L的NaOH溶液中，3-5℃条件下搅拌均匀，浸泡2-4d，水洗3-5次，得预处理牛皮；

所述的，牛皮与氯化钠溶液、NaOH溶液的重量比为1：4-6：3-5。

牛皮先经氯化钠溶液常温浸泡，去除牛皮上的部分脂肪、杂蛋白等杂质；再经NaOH溶液搅拌处理，去除牛皮中非胶原蛋白的同时，还可以松散牛皮纤维，改善牛皮的组织结构，显著提高其渗透性，缩短提取时间。

2)变性处理：将预处理牛皮和水按照1：5的质量比混合，0.8-1.0MPa条件下，100℃煮沸20-30min，降温至50-60℃，双层纱布滤去残渣，得变性牛皮；

高温高压条件下进行变性处理，使牛皮中的胶原蛋白分子迅速解螺旋并发生断裂，破坏其稳定结构。

3)激发处理：将变性牛皮加至激发液中，35-45℃条件下浸泡30-50min，升温至80-85℃，保持3-5min，自然冷却至室温，水洗，控干水分，烘干，粉碎后过80-100目筛，得激发牛皮粉；

所述的，变性牛皮与激发液的重量比为1：4-6。

所述的，激发液是由以下重量份的原料制得的：L-精氨酸2-4份、水溶性壳聚糖3-5份、硫酸钠5-7份、三氯蔗糖2份、水100份。