[发明专利]WDR67抑制剂及其在抑制肝癌细胞生长和转移中的应用

说明书

本发明公开了WDR67抑制剂及其在抑制肝癌细胞生长和转移中的应用。具体地公开了WDR67抑制剂在制备治疗或预防肝癌的药物中的应用，所述WDR67抑制剂可为抑制WDR67基因表达、沉默或敲除WDR67基因的物质，和/或，抑制WDR67蛋白含量和/或活性的物质。本发明首次发现通过降低WDR67基因的表达或活性可以显著地抑制肝癌细胞的生长，根据RNAi原理，通过设计短发卡RNA(shRNA)序列，将其克隆到慢病毒载体载体中包装成慢病毒感染肝癌细胞构建了稳定敲低WDR67基因的肝癌细胞株，体外和体内实验结果均表明，敲低WDR67会显著抑制肝癌细胞的生长，并对肝癌细胞的增殖和迁移具有很强的抑制作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及WDR67抑制剂及其在抑制肝癌细胞生长和转移中的应用。

背景技术

原发性肝癌(Primary liver cancer，PLC)是指发生于肝细胞和肝内胆管上皮细胞的癌，是一种死亡率较高的恶性肿瘤。肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC；以下简称肝癌)起源于肝脏上皮细胞(即肝细胞)，约占PLC的90％，具有起病隐匿，治疗效果差和预后恶劣的特点。解析肝癌发生发展的分子机制对肝癌的早期诊断及制定新的治疗策略具有十分重要的意义。

表皮生长因子受体(Epidergrowth factor receptor，EGFR)是受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinases，RTK)家族成员之一，已被证明在细胞恶性转化和肿瘤转移中发挥重要作用。大规模的基因组研究表明，在多种类型的癌症中，EGFR常因基因组变异而受到激活。相比之下，肝癌患者中只有不到5％的个体携有致瘤性EGFR突变或拷贝数扩增。然而，EGFR蛋白在60％的肝癌患者肿瘤中普遍高表达，并与肿瘤的侵袭性密切相关。这种不一致性表明在肝癌中存在替代机制来解释EGFR蛋白异常高表达。越来越多的证据表明，RabGTPases介导的EGFR内吞及胞内转运异常是调节EGFR表达和活性的一种新机制。然而，在肝癌细胞中，EGFR异常的胞内转运仍然未得到全面解析。因此鉴定可靶向参与调控EGFR异常转运和激活的TBC-Rab信号轴可作为抗肿瘤药物筛选的一个重要切入点。

本发明利用了从超过800名肝癌患者中收集的转录组数据集，通过生物信息学分析，鉴定发现了15个与肝癌相关的显著体细胞拷贝数变异(Copy number alteration，CNA)。其中，染色体8q24.13区域的拷贝数扩增与患者不良预后显著相关。结合高内涵功能筛查和后续功能分析，发现位于该扩增区域的WDR67是一种新的癌基因。机制上，WDR67可以水解Rab22A，将GTP形式的Rab22A水解为无转运活性的GDP形式的Rab22A，延迟其介导的EGFR从早期胞内体转运至溶酶体的过程，从而持续激活EGFR信号通路，促进肝癌生长和转移。综上，靶向WDR67的策略可以通过抑制肝癌细胞中的EGFR活性实现对肝癌细胞生长和转移的抑制。

发明内容

本发明的目的是提供一种WDR67抑制剂在制备治疗或预防肝癌的药物中的应用。本发明所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

为实现上述目的，本发明首先提供了WDR67抑制剂在制备治疗或预防肝癌的药物中的应用。

上述应用中，所述治疗或预防肝癌的药物可具有下述至少一种功能：

A1)抑制肝癌细胞生长或增殖；

A2)抑制肝癌细胞侵袭和/或迁移；

A3)抑制肝癌细胞的成瘤能力；

A4)抑制依赖于Rab22A的GTP水解酶活性；

A5)在肝癌细胞中抑制EGFR信号通路的活性，并特异抑制其下游的MEK-ERK通路和PI3K-AKT通路；

A6)降低肝癌细胞对MEK抑制剂的耐药性。