[发明专利]斑石鲷铁调肽基因及其重组蛋白的制备方法与应用在审
| 申请号： | 202210527343.8 | 申请日： | 2022-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN115010798A | 公开（公告）日： | 2022-09-06 |
| 发明（设计）人： | 陈松林;王洁;陈亚东;徐文腾;张子威;张婷婷;李明 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C07K14/46 | 分类号： | C07K14/46;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/17;A61P31/04;A23K50/80;A23K20/147;C12R1/19 |
| 代理公司： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人： | 王晓晓 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 斑石鲷铁调肽 基因 及其 重组 蛋白 制备 方法 应用 | ||
1.斑石鲷铁调肽，其特征在于，所述斑石鲷铁调肽具有下列氨基酸序列之一：
(1)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；
(2)如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；
(3)如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
(4)与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、或与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、或与SEQID NO:3所示的氨基酸序列具有70％以上同源性，且具有与所述斑石鲷铁调肽相同功能的氨基酸序列。
2.权利要求1所述的斑石鲷铁调肽的编码基因，其特征在于，所述编码基因具有下列核苷酸序列之一：
(1)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；
(2)如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列；
(3)如SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列；
(4)与SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列、或与SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列、或与SEQID NO:9所示的核苷酸序列具有70％以上同源性且编码所述斑石鲷铁调肽功能的核苷酸序列。
3.含有权利要求2所述的斑石鲷铁调肽的编码基因的重组表达质粒。
4.含有权利要求2所述的斑石鲷铁调肽的编码基因的重组菌株。
5.含有权利要求1所述的斑石鲷铁调肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)利用PCR方法或直接进行人工合成的方法获得核苷酸序列分别如SEQ ID NO:7、SEQID NO:8和SEQ ID NO:9所示的斑石鲷铁调肽的编码基因，得到铁调肽基因；
(2)将步骤(1)中的铁调肽基因的成熟肽的核苷酸序列分别插入到原核表达载体中，构成铁调肽重组表达质粒；
(3)将步骤(2)中的铁调肽重组表达质粒转入大肠杆菌菌株工程菌，进行诱导表达，得到重组抗菌肽蛋白；
(4)对步骤(3)中的重组抗菌肽蛋白进行分离、纯化，得到斑石鲷铁调肽OpHep1、OpHep2和OpHep3。
6.权利要求1所述的制备的斑石鲷铁调肽在用于制备细菌抑菌剂中的应用。
7.根据权利要求5所述的斑石鲷铁调肽在用于制备细菌抑菌剂中的应用，其特征在于，所述抑菌剂的成分为斑石鲷重组抗菌肽蛋白。
8.权利要求1所述的斑石鲷铁调肽用于制备防治细菌性疾病的药物或饲料添加剂中的应用。
9.一种用于抑菌的药物，其特征在于，所述药物含有氨基酸序列如SEQ ID NO:4、SEQID NO:5或SEQ ID NO:6所示的斑石鲷铁调肽重组抗菌肽。
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