[发明专利]一种提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法

权利要求书

1.一种提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus) 菌粉的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

（1）将嗜酸乳杆菌在MRS琼脂培养基上进行划线分离培养，至所述MRS琼脂培养基中出现直径至少为4-5 mm的菌落；

（2）将步骤（1）培养得到的菌落接种于MRS液体培养基中进行梯度发酵培养，结束培养后再向MRS液体培养基中混合渗透压调节剂和酶类物质，收集，得到菌体；

所述梯度发酵培养的程序为：在36-38℃下发酵培养2-2.5 h，再将温度降至34-36℃发酵培养4-4.5 h，再将温度降至31-33℃发酵培养6-6.5 h，再将温度降至29-31℃发酵培养8-8.5 h，最后将温度降至27-29℃结束培养；

（3）将步骤（2）得到的菌体与保护剂混合，进行静电干燥，得到嗜酸乳杆菌菌粉；

步骤（1）中，所述嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus LA85菌株，保藏编号为CGMCC No.1.12735，保藏日期为2020年07月20日；

步骤（2）中，所述梯度发酵培养的过程需控制发酵液pH为5.0-5.8；

步骤（2）中，所述渗透压调节剂的添加量占所述MRS液体培养基的0.2 wt%；其中，所述渗透压调节剂为四氢嘧啶；所述酶类物质的添加量占所述MRS液体培养基的0.1-0.5 wt%；其中，所述酶类物质为过氧化氢酶。

2.根据权利要求1所述的提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述分离培养的温度为36-38℃，所述分离培养的时间为48-72 h。

3.根据权利要求1所述的提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述控制发酵液pH的物质为碱性混合物。

4.根据权利要求3所述的提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，所述碱性混合物选自氨水和碳酸钠的混合物、氢氧化钠和碳酸钠的混合物、氢氧化钠和氨水的混合物、硝酸钠和氨水的混合物、硝酸钠和氢氧化钠的混合物、硝酸钠和碳酸钠的混合物中的任意一种或至少两种的组合。

5.根据权利要求1所述的提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述菌体与保护剂的质量比为(1-2):(1-3)；

其中，所述保护剂按质量百分含量计由如下组分组成：海藻糖10-30%、蔗糖0.5-5%、甘油0.5-3%，余量为水。

6.根据权利要求1所述的提高可培养细胞含量的嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述静电干燥采用喷嘴式喷雾干燥器进行，具体条件为：进风温度为40-60℃，进风流量为15-25 Nm³/h，出风温度为20-30℃，雾化温度为30-46℃，雾化压力为100-350 kPa，静电电压为1-30 kV。