[发明专利]一株抗十氯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

说明书

本发明涉及一株抗十氯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，涉及食品安全免疫检测技术领域。本发明提供的抗十氯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株，于2022年03月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.45115。本发明提供的细胞株分泌的单克隆抗体对十氯酮具有较好的特异性和检测灵敏度(ICsubgt;50/subgt;值为1.1μg Lsupgt;‑1/supgt;)，可实现对十氯酮残留量的检测，为食品中十氯酮残留的免疫检测提供了原料，具有实际应用价值。

技术领域

本发明涉及食品安全免疫检测技术领域，尤其涉及一株抗十氯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。

背景技术

十氯酮(chlordecone，CLD)又称为开蓬(Kepone)，是一种人工合成的有机氯杀虫剂。十氯酮因其难溶于水，有很强的疏水性，特别易于富集在生物体中，并且难以进行化学和生物降解，以及具有长距离跨界迁移的可能性，可以在环境中持久存在具有持久性有机污染物(POPs)的特性已被禁用。十氯酮曾广泛用于控制香蕉根蛀虫.它还用于苍蝇幼虫杀虫剂、杀菌剂、控制马铃薯甲虫、锈螨、马铃薯和烟草切根虫以及用于蚂蚁和蟑螂诱剂中，十氯酮是一种毒性较高的有机物，对胎儿中枢神经系统、泌尿生殖系统、免疫系统有一定影响。十氯酮可影响人体神经系统，使人体产生颤抖、体重下降、眼球痉挛、肋膜炎、关节痛、肝肿大和精子减少等症状。人体和动物的实验研究表明，十氯酮被吸收后，主要富集在肝脏，通过胆汁缓慢代谢，经过粪便排出体外，十氯酮对大鼠和小鼠有明显的致癌性，能使肝脏等其它器官产生恶性肿瘤.由于人类和老鼠都是哺乳类动物，有理由认为十氯酮对人体有可能的致癌性。因此，建立快速有效的检测十氯酮含量的方法具有重要意义及市场价值。

针对十氯酮的高效灵敏的检测方法是亟待解决的问题。目前的检测方法包括仪器分析法和免疫分析法。仪器分析法如高效液相色谱法(王荟,彭英,穆肃,等.气相色谱-串联质谱法测定土壤中十氯酮[J].中国环境监测,2015(5)：129-133；Saint-Hilaire M,Inthavong C,Bertin T,Lavison-Bompard G,Guérin T,Fournier A,Feidt C,Rychen G,Parinet J.Development and validation of an HPLC-MS/MS method with QuEChERSextraction using isotopic dilution to simultaneously analyze chlordecone andchlordecol in animal livers.Food Chem.2018,30；252：147-153.)、气相色谱串联质谱法(Martin-Laurent F,Sahnoun MM,Merlin C,Vollmer G,Lübke M.Detection andquantification of chlordecone in contaminated soils from the French WestIndies by GC-MS using the 13C10-chlordecone stable isotope as a tracer[J].Environ Sci Pollut Res Int.2014,21(7)：4928-4933；ALAIN SOLER,MARC LEBRUN,YOANLABROUSSE,et al.Solid-phase microextraction and gas chromatography-massspectrometry for quantitative determination of chlordecone in water,plant andsoil samples[J].Fruits,2014(4)：325-339)。由于对样品前处理繁琐，干扰物较多及仪器工作条件的限制，同时对操作人员的技术要求较高，因此仪器方法并不适用于现场检测。

免疫分析方法相对于仪器检测方法，具有低成本、高通量、高灵敏、对技术人员要求低等特点，因此适用于大量样品的快速筛查。因此免疫检方法对十氯酮的检测具有重要意义。