[发明专利]一种利用聚球藻基因的启动子检测水体营养盐生物可利用度的方法

权利要求书

1.一种转基因聚球藻，其特征在于，所述转基因聚球藻中含有对水体营养盐缺乏敏感的聚球藻基因的启动子序列和荧光蛋白基因片段组成的重组表达元件。

2.根据权利要求1所述转基因聚球藻，其特征在于，所述重组表达元件为含有对水体营养盐缺乏敏感的聚球藻基因的启动子序列和荧光蛋白基因片段的重组表达载体。

3.根据权利要求1所述转基因聚球藻，其特征在于，所述对水体营养盐缺乏敏感的聚球藻基因为对氮、磷或铁元素缺乏敏感的聚球藻基因。

4.根据权利要求3所述转基因聚球藻，其特征在于，所述对氮元素缺乏敏感的聚球藻基因为A1821或D0010，所述对磷元素缺乏敏感的聚球藻基因为A2284或A2352，所述对铁元素缺乏敏感的聚球藻基因为A1291或G0079。

5.根据权利要求4所述转基因聚球藻，其特征在于，所述A1821基因的启动子序列如SEQID NO.1所示，D0010基因的启动子序列如SEQ ID NO.2所示；A2284基因的启动子序列如SEQID NO.3所示，A2352基因的启动子序列如SEQ ID NO.4所示；A1291基因的启动子序列如SEQID NO.5所示，G0079基因的启动子序列如SEQ ID NO.6所示。

6.根据权利要求1～5任一所述转基因聚球藻，其特征在于，所述聚球藻为聚球藻7002。

7.权利要求1～6任一所述转基因聚球藻在检测水体营养盐生物可利用度中的应用。

8.一种利用权利要求1～6任一所述转基因聚球藻检测水体营养盐生物可利用度的方法，其特征在于，包含以下步骤：

S1.确定待测的营养盐元素，配制含不同浓度梯度的待测营养盐元素的培养基，将含有对待测营养盐元素缺乏敏感的聚球藻基因的启动子序列和荧光蛋白基因片段组成的重组表达元件的转基因聚球藻置于所述不同浓度梯度的培养基中培养，测定荧光值，绘制营养盐浓度与荧光值关系标准曲线；

S2.将与步骤S1相同的转基因聚球藻置于待测水体样品中，用与步骤S1相同的条件培养后测定荧光值，利用步骤S1所得标准曲线计算所测水体样品中与标曲对应的营养盐元素的浓度。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，转基因聚球藻的培养温度为28～30℃，光照条件为100±10μE m^-2s^-1。

10.根据权利要求8所述方法，其特征在于，在绘制标准曲线前，先将转基因聚球藻置于对应的缺素培养基中培养，进行饥饿处理。