[发明专利]一种酶标板用封闭液及其在TPO-Ab酶免疫检测中的应用

说明书

本发明公开了一种酶标板用封闭液及其在TPO‑Ab酶免疫检测中的应用，该封闭液中含有ZIF‑70且其含量为0.02～0.18g/L。该封闭液用于TPO‑Ab酶免疫检测中，能显著提高检测信号强度和酶标板的稳定性，即使在50℃的高温下也能稳定保存3个月以上，而且容易配制、成本低，便于工业化生产。

技术领域

本发明涉及酶联免疫技术领域，具体涉及一种高稳定性的酶标板用封闭液及其在抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)的免疫检测中的应用。

背景技术

甲状腺过氧化物酶(TPO)是甲状腺微粒体的主要抗原成分，其功能与甲状腺素的合成有关。抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)或抗甲状腺微粒体抗体(TMA)可能使甲状腺细胞损伤。检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的方法与抗甲状腺球蛋白抗体类似，测定抗甲状腺过氧化物酶抗体的临床意义与抗甲状腺球蛋白抗体也大致相同，主要对于慢性淋巴细胞性甲状腺炎、甲状腺功能亢进症、原发性甲状腺功能减退症，有辅助诊断、疗效考核价值。TPO-Ab与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发生、发展密切相关，可通过细胞介导和抗体依赖的细胞毒作用使甲状腺激素分泌不足造成自身免疫相关的甲减，作为自身免疫性甲状腺疾病的诊断和监测指标，TPO-Ab比TMA具有更好的灵敏度、特异性、更可靠和有意义，已成为诊断甲状腺自身免疫性疾病的首选指标。TPOA的主要临床应用：诊断桥本氏病(HD)和自身免疫性甲亢；毒性弥慢性甲状腺肿(Graves)；监测免疫治疗效果；检测家族甲状腺疾病的发病可能；预测孕妇产后甲状腺功能障碍的发生。在后期的临床检测中会扮演越来越重要的角色。

在抗甲状腺过氧化物酶抗体的免检测试剂盒中，酶标板作为免疫检测试剂盒的关键组分之一，不仅要有一定的敏感度和特异性，其重复性和稳定性也是非常重要的，良好的稳定性是其数据可靠性的一个重要标志。但是在目前的检测试剂盒中，酶标板包被的是TPO抗原，是一种稳定性非常差的蛋白。当TPO抗原包被于酶标板中后，在运输及长期保存的过程中，抗原的结构有可能发生改变，导致酶标板原有的检测功能衰退或彻底丧失，从而导致检测试剂的整体失效。而且，近年来全球极端天气频发，这对TPO-Ab试剂盒的出口考验也越来越严格，需要花费大量的成本用于运输与保存。

发明内容

针对现有技术中的问题，本发明的目的在于提供一种能够封闭并且保持酶标板稳定性的酶标板用封闭液，达到有效延长TPO-Ab酶联免疫试剂盒在极端情况下的保质期。

为了实现上述目的，本发明的技术方案具体如下：

本发明提供了一种酶标板用封闭液，其含有金属有机框架化合物ZIF-70且含量为0.02～0.18g/L。ZIF-70的分子式C₆H₅N₅O₂Zn，分子量为244.5262，选用的配位金属Zn配体咪唑和2-硝基咪唑进行合成。

更加优选地，其具体合成方法可以为：咪唑、2-甲基咪唑与醋酸锌按照摩尔比为4:4:1的比例进行混合，混合之后在室温反应12h形成ZIF-70晶体，离心收集后用去离子水洗涤两遍，然后真空干燥即可得到。

更加优选地，酶标板用封闭液以磷酸盐缓冲液为溶剂，并包括以下组分：

所述酶标板用封闭液的pH为5.5～10.0。

更加优选地，所述生物防腐剂为Proclin300。

以其广谱活性、优越的兼容性和稳定性及其在使用浓度下的低毒性，Proclin300成为用于诊断试剂的理想高效防腐剂。Proclin300防腐剂可在更长的时间内根除细菌、真菌及酵母，从而延长产品的储存时间。同时其水溶性确保其可轻易溶入所需试剂中，且在推荐使用浓度内无害健康。

更加优选地，酶标板用封闭液以磷酸盐缓冲液为溶剂，pH为7.4，并包括以下组分：

ZIF-70 0.1g/L，