[发明专利]一种病毒蛋白逃逸中和抗体的筛选方法及应用在审

专利信息
申请号: 202210469132.3 申请日: 2022-04-30
公开(公告)号: CN114736930A 公开(公告)日: 2022-07-12
发明(设计)人: 汤华民;贾俊丽;王宇航 申请(专利权)人: 南京医科大学
主分类号: C12N15/867 分类号: C12N15/867;C12N15/65;C12N15/50
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;李晓峰
地址: 211166 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 病毒 蛋白 逃逸 中和 抗体 筛选 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种病毒蛋白逃逸中和抗体的筛选方法,其特征在于,该筛选方法为:构建病毒蛋白的随机突变文库,并将所述的随机突变文库导入慢病毒质粒载体获得慢病毒质粒文库;将所述的慢病毒质粒文库包装成假病毒,并与中和抗体中和,将未被中和抗体中和的假病毒感染表达血管紧张素转化酶2和细胞丝氨酸蛋白酶的细胞,筛选出表达绿色荧光蛋白的细胞,并提取DNA进行序列分析,即可筛选出能逃逸中和抗体的病毒序列。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:构建病毒蛋白的随机突变文库时,所针对的病毒为新冠病毒、流感病毒、艾滋病毒和呼吸道合胞病毒中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的病毒蛋白为S蛋白、N蛋白、M蛋白和E蛋白中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述随机突变的随机突变区为:S蛋白的RBD区、S1区、S2区或去除RBD的S1区。

5.根据权利要求1~4中任意一项所述的方法,其特征在于:构建新冠病毒S蛋白RBD区随机突变文库。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的慢病毒质粒载体为表达绿色荧光蛋白的S蛋白慢病毒质粒载体。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的表达血管紧张素转化酶2和细胞丝氨酸蛋白酶的细胞为表达血管紧张素转化酶2和细胞丝氨酸蛋白酶的293T细胞。

8.权利要求1~7中任意一种所述的方法在筛选能逃逸中和抗体的病毒突变体序列中的应用。

9.采用权利要求1~7中任意一种所述的方法筛选出的能逃逸中和抗体的病毒突变体序列。

10.根据权利要求9所述的病毒突变体序列在制备病毒抗体治疗剂或疫苗中的应用。

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